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- IOC - Artigos de Periódicos [12488]
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CONFORMATIONAL DISSECTION OF THERMOMYCES LANUGINOSUS LIPASE IN SOLUTION
Oligomer
Small angle x-ray scattering
Ion mobility mass spectrometry
Circular dichroism
Fluorescence
Autor
Afiliación
Universidade Federal do Rio de Janeiro. Faculdade de Farmácia. Instituto de Química. Centro de Tecnologia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Universidade de São Paulo. Instituto de Física. são Paulo, SP, Brasil.
Universidade Federal do Rio de Janeiro. Faculdade de Farmácia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Instituto Nacional de Metrologia, Qualidade e Tecnologia (INMETRO). Laboratório de Biologia Estrutural. Duque de Caxias, RJ, Brasil.
Universidade Federal do Rio de Janeiro. Instituto de Microbiologia Paulo de Góes. Departamento de Virologia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório Interdisciplinar de Pesquisas Médicas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Universidade Federal do Rio de Janeiro. Faculdade de Farmácia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Universidade Federal do Rio de Janeiro. Instituto de Química. Centro de Tecnologia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Universidade Federal do Rio de Janeiro. Instituto de Química. Centro de Tecnologia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Universidade Federal do Rio de Janeiro. Faculdade de Farmácia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Universidade de São Paulo. Instituto de Física. são Paulo, SP, Brasil.
Universidade Federal do Rio de Janeiro. Faculdade de Farmácia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Instituto Nacional de Metrologia, Qualidade e Tecnologia (INMETRO). Laboratório de Biologia Estrutural. Duque de Caxias, RJ, Brasil.
Universidade Federal do Rio de Janeiro. Instituto de Microbiologia Paulo de Góes. Departamento de Virologia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório Interdisciplinar de Pesquisas Médicas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Universidade Federal do Rio de Janeiro. Faculdade de Farmácia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Universidade Federal do Rio de Janeiro. Instituto de Química. Centro de Tecnologia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Universidade Federal do Rio de Janeiro. Instituto de Química. Centro de Tecnologia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Universidade Federal do Rio de Janeiro. Faculdade de Farmácia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Resumen en ingles
Lipases are triacyl glycerol acyl hydrolases, which catalyze hydrolysis of esters, esterification and
transesterification reactions, among others. Some of these enzymes have a large hydrophobic pocket covered
by an alpha-helical mobile surface loop (the lid). Protein–protein interactions can occur through adsorption of
two open lids of individual lipases. We investigated the conformation and oligomeric state of Thermomyces
lanuginosus lipase (TLL) in solution by spectroscopic and mass spectrometry techniques. Information about oligomerization
of this important industrial enzyme is only available for TLL crystals; therefore, we have done a
throughout investigation of the conformation of this lipase in solution. SDS-PAGE andmass spectrometry analysis
of size-exclusion chromatography eluted fractions indicated the presence of both monomeric and dimeric populations
of TLL. The stability of the enzyme upon thermal and guanidine hydrochloride treatmentwas examined
by circular dichroismand fluorescenceemission spectroscopy.Small angle x-ray scattering and ion mobility mass
spectrometry analysis revealed that TLL is found as a mixture of monomers and dimers at the assayed concentrations.
Although previous x-ray diffraction data showed TLL as a dimer in the crystal (PDB: 1DT3), to our knowledge
our report is the first evidencing that TLL co-exists as stable dimeric and monomeric forms in solution.
Palabras clave en ingles
LipaseOligomer
Small angle x-ray scattering
Ion mobility mass spectrometry
Circular dichroism
Fluorescence
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