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ENSAIO IMUNOENZIMÁTICO COM ANTÍGENO DE LEISHMANIA (VIANNIA) BRAZILIENSIS NO DIAGNÓSTICO E ACOMPANHAMENTO DE PACIENTES COM LEISHMANIOSE TEGUMENTAR AMERICANA
Ensaio de Imunoadsorção Enzimática
Leishmania braziliensis
Reação em Cadeia da Polimerase
Confort, Eliame Mouta | Fecha del documento:
2009
Autor
Afiliación
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Infectologia Evandro Chagas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil
Resumen en portugues
Avaliou-se o ensaio imunoenzimático indireto (ELISA) com antígeno de Leishmania (V.) braziliensis para a investigação diagnóstica da leishmaniose tegumentar americana (LTA) em suas modalidades cutânea (LC) e cutâneomucosa (LCM) e avaliação da resposta terapêutica a partir de amostras de soro de pacientes atendidos no Instituto de Pesquisa Clínica Evandro Chagas (IPEC). O grupo I, LTA (n=153) foi formado com amostras de soros de pacientes com pelo menos um resultado positivo nos exames parasitológicos ou na reação em cadeia da polimerase (PCR), e o grupo II, controle (n=103), com amostras de indivíduos representativos da população do estudo, com suspeita inicial de LTA, mas com outro diagnóstico confirmado. As seguintes informações foram obtidas dos prontuários: avaliação clínica, dermatológica otorrinolaringológica; intradermorreação de Montenegro IDRM; pesquisa de Leishmania por exame direto e histopatológico, isolamento em meio de cultura, PCR e exames diretos com colorações especiais, inoculação em meios de cultura para fungos e micobactérias. As amostras foram obtidas nas fases de investigação diagnóstica e pós-tratamento em períodos definidos até dois anos. Comparou-se a sensibilidade do ELISA com a de cada um dos métodos parasitológicos, PCR e com a IDRM. Para avaliação da resposta terapêutica, amostras de 75 pacientes que se mantiveram com as lesões cicatrizadas durante o período do estudo constituíram o subgrupo cura terapêutica (ICT) e aquelas de 31 pacientes com recidivas constituíram o subgrupo recidiva pósterapêutica (IRT). A confiabilidade do teste avaliado pelo coeficiente de correlação intraclasse foi de 0,953 (IC 95%)
Encontrou-se sensibilidade de 94,7%, especificidade de 95,1% e valores preditivos, positivo e negativo de 96,6% e 92,4% respectivamente. Não houve diferença com significância estatística entre as sensibilidades encontradas no ELISA, na PCR e na IDRM (CI= 95%, qui-quadrado pvalor= 0,140 e p-valor=0,498). O mesmo não ocorreu com os demais métodos parasitológicos (p-valor<0,001). A análise da resposta humoral à terapia demonstrou haver redução da resposta de anticorpos nos pacientes do subgrupo ICT significativamente menor aos seis meses após o tratamento (Wilcoxon; pvalor= 0,016) com 51,8% de pacientes não reatores ao final de dois anos após a terapia. Os demais se encontravam fracamente reatores. Ao contrário, no subgrupo IRT, houve pequena redução seguida de elevação dos valores de densidade otica atingindo patamares mais elevados na ocasião da recidiva. Comparando-se estes subgrupos (ICT e IRT) quanto à intensidade das reações e frequencia de reatores, em cada ponto do acompanhamento, encontraram-se diferenças a partir do sexto mês após a terapia e a cura clínica (Mann-Whitney; p-valor=0,046 e p-valor 0,009). Os resultados demonstram um bom desempenho do ELISA no diagnóstico diferencial de LTA e na avaliação da resposta terapêutica
Resumen en ingles
Indirect Enzyme Immunoassay (EL
ISA) was evaluated with
Leishmania (V.)
braziliensis
antigen to the diagnostic workup of
American
Tegumentary
Leishmaniasis (American
Tegumentary
Leishmaniasis
-
ATL
) in their
cutaneous
(CL)
and mucocutaneous (MCL) modalities, and about the therapeutic res
ponse from
samples of serum from patients at the Instituto de Pesquisa Clínica Evandro Chagas
(IPEC).
Group I
, ACL (n = 153) was formed with sera samples of patients with at
least one positive result in parasitological examinations or in polymerase chain
r
eaction (PCR), and
group II
,
control
(n = 103), with samples of individuals
representative of the study population, with initial suspicion of ACL, but with other
confirmed diagnosis. The following information was obtained from medical records:
clinical, de
rmatological, and
otorrinolaringology
evaluation;
measure in mm
of
Montenegro intradermoreaction (IDRM); search for
Leishmania
by direct examination
and histopathology, isolation in culture media, PCR and direct examination with
special staining and inocul
ation in culture media for fungi and mycobacteria. Samples
were obtained during the diagnostic workup and after treatment, in periods defined
as
up to
two years. We compared the sensitivity of the ELISA with each of the
individual parasitological methods,
the PCR, and the IDRM. To evaluate the
therapeutic response, samples of 75 patients who remained with the lesions healed
during the study period were the
therapeutic healing subgroup
(
ICT
) and those 31
patients with recurrences were the
post
-
therapy relaps
e subgroup
(
IRT
).
The
reliability of
the
test assessed by the intraclass correlation coefficient was 0.953 (95%
CI).
We found a sensitivity of 94.7% and 95.1% specificity, and positive and negative
predictive values of 96.6% and 92.4%, respectively. There
was no statistically
significant difference between the sensitivities found in ELISA, PCR and IDRM (95%
CI, Chi
-
square
p
-
value = 0.140 and
p
-
value = 0.498). The same did not happen with
the remainder parasitological methods (
p
-
value <0.001). The analysis o
f the humoral
response to therapy have demonstrated a decrease of the antibody response in
patients of
subgroup ICT
, significantly lower at six months after treatment (Wilcoxon;
p
-
value = 0.016), with 51.8% of patients non reactors at the end of two years
after the
therapy. The others remained mild reactors. Contrarily, in
subgroup IRT,
a small
reduction of the intensity of the reactions, was followed by the increase in the values
of optical density that reached higher levels during recidive. Analyzed toget
her, the
results of samples from the
IRT subgroup
were significantly higher than those from
the
ICT subgroup
(Mann
-
Whitney;
p
-
value <0.0001).
The intensity of reactions and
the frequency of reactors there were reduce
from the six months
after the therapia
sustaining this thendency
afther the clinical cure.
When comparing
the intensity of
reactions and frequency of reactors in each point of
follow
-
up
there were differences
from the sixth month of therapy and clinical cure (Mann
-
Whitney;
p
-
value = 0.046 and
p
-
value 0.009). The results show a good performance of the ELISA in the differential
diagnosis of ACL and the assessment of therapeutic response.
DeCS
Leishmaniose CutâneaEnsaio de Imunoadsorção Enzimática
Leishmania braziliensis
Reação em Cadeia da Polimerase
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