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CHARACTERIZATION OF THE PATTERN OF RIBOSOMAL PROTEIN L19 PRODUCTION DURING THE LIFECYCLE OF LEISHMANIA SPP
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Universidade de São Paulo. Departamento de Biologia Celular e Molecular e Bioagentes Patogênicos. Faculdade Medicina de Ribeirão Preto. Ribeirão Preto, SP, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Carlos Chagas. Laboratório de Regulação da Expressão Gênica. Curitiba, PR, Brasil.
Universidade de São Paulo. Departamento de Biologia Celular e Molecular e Bioagentes Patogênicos. Faculdade Medicina de Ribeirão Preto. Ribeirão Preto, SP, Brasil.
Universidade de São Paulo. Departamento de Biologia Celular e Molecular e Bioagentes Patogênicos. Faculdade Medicina de Ribeirão Preto. Ribeirão Preto, SP, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Carlos Chagas. Laboratório de Regulação da Expressão Gênica. Curitiba, PR, Brasil.
Universidade de São Paulo. Departamento de Biologia Celular e Molecular e Bioagentes Patogênicos. Faculdade Medicina de Ribeirão Preto. Ribeirão Preto, SP, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Carlos Chagas. Laboratório de Regulação da Expressão Gênica. Curitiba, PR, Brasil.
Universidade de São Paulo. Departamento de Biologia Celular e Molecular e Bioagentes Patogênicos. Faculdade Medicina de Ribeirão Preto. Ribeirão Preto, SP, Brasil.
Universidade de São Paulo. Departamento de Biologia Celular e Molecular e Bioagentes Patogênicos. Faculdade Medicina de Ribeirão Preto. Ribeirão Preto, SP, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Carlos Chagas. Laboratório de Regulação da Expressão Gênica. Curitiba, PR, Brasil.
Universidade de São Paulo. Departamento de Biologia Celular e Molecular e Bioagentes Patogênicos. Faculdade Medicina de Ribeirão Preto. Ribeirão Preto, SP, Brasil.
Resumen en ingles
Leishmania is a genus of protozoan parasites causing a wide clinical spectrum of diseases in humans. Analysis
of a region of chromosome 6 from Leishmania major (Iribar et al.) showed that the transcript of a
putative L19 ribosomal protein (RPL19) was most abundant at the amastigote stage. We therefore decided
to characterize L19 protein abundance throughout the lifecycle of Leishmania. Differential expression of
the L19 gene during development has been observed for all Leishmania species studied to date (L. major,
L. braziliensis, L. donovani, and L. amazonensis). Immunoblotting with polyclonal antibodies against L. major
RPL19 revealed that changes to L19 protein abundance follow a similar pattern in various species. The
amount of L19 protein was higher in exponentially growing promastigotes than in stationary phase
promastigotes. The L19 protein was barely detectable in amastigotes, despite the abundance of L19 transcripts
observed in L. major at this stage. Immunofluorescence assays showed a granular, dispersed
distribution of RPL19 throughout the cytoplasm. Subcellular fractionation confirmed the presence of the
protein in the ribosomal fraction, but not in the cytosol of L. major. We generated a L. major transfectant
bearing a plasmid-borne L19 gene. Overproduction of the L19 transcript and protein resulted in impaired
growth of the transfectants in association with high polysome peaks. We also showed by metabolic
labeling that L19 overexpressing clones display low rates of translation. These data suggest that L19
overexpression affects negatively translation elongation or termination. The lack of correlation between
L19 transcript and protein abundances suggest that the translation of L19 is differentially controlled during
development in the various species investigated.
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