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EXPRESIÓN DIFERENCIAL DE PROTEÍNAS EN LEISHMANIA (VIANNIA) PANAMENSIS ASOCIADAS CON MECANISMOS DE RESISTENCIA A ANTIMONIATO DE MEGLUMINA
Proteômica
Electroforese
Espectrometria de massa
Reação em Cadeia da Polimerase
proteómica
electroforesis
espectometria de masas
reacción en cadena de la polimerasa
Afiliación
Universidad de Antioquia. Facultad de Medicina. Programa de Estudio y Control de Enfermedades Tropicales, PECET. Medellin, Colombia.
Universidad de Antioquia. Facultad de Medicina. Programa de Estudio y Control de Enfermedades Tropicales, PECET. Medellin, Colombia.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Universidad de Antioquia. Facultad de Medicina. Programa de Estudio y Control de Enfermedades Tropicales, PECET. Medellin, Colombia.
Universidad de Antioquia. Facultad de Medicina. Programa de Estudio y Control de Enfermedades Tropicales, PECET. Medellin, Colombia.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Universidad de Antioquia. Facultad de Medicina. Programa de Estudio y Control de Enfermedades Tropicales, PECET. Medellin, Colombia.
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Introducción. Los mecanismos de resistencia al antimonio pentavalente conocidos hasta el momento,
se han descrito ampliamente en cepas del subgénero Leishmania, pero poco se sabe sobre las
proteínas involucradas en los mecanismos de resistencia presentes en cepas del subgénero Viannia,
como Leishmania panamensis.
Objetivo. Identificar proteínas diferencialmente expresadas entre las cepas de L. panamensis
(UA140), sensible y resistente al antimonio pentavalente, y analizar el posible papel de estas proteínas
en mecanismos de resistencia.
Materiales y métodos. Las proteínas de las cepas, sensible y resistente al antimonio pentavalente, se
compararon usando electroforesis bidimensional. Las proteínas con aumento de la expresión fueron
aisladas e identificadas por espectrometría de masas mediante MALDI-TOF/TOF (Matrix Assisted
Laser Desorption Ionization/Time of Flight). La expresión del ARNm de cinco de estas proteínas se
cuantificó mediante PCR en tiempo real.
Resultados. Los geles bidimensionales de las cepas sensible y resistente detectaron 532±39 y 541±43
manchas proteicas. Se encontraron 10 manchas con aumento de la expresión en la cepa resistente,
identificadas como proteínas de choque térmico (Hsp60 mitocondrial, Hsp70 mitocondrial y citosólica),
isomerasa de disulfuro, proteasa de cisteína, enolasa, factor de elongación 5-α, la subunidad 5-α del
proteasoma y dos proteínas hipotéticas nombradas como Sp(2) y Sp(25).
Conclusión. Este es el primer estudio llevado a cabo con una cepa resistente al antimonio pentavalente
en L. panamensis, en el cual se han identificado proteínas que están relacionadas con el mecanismo
de resistencia del parásito frente al medicamento, abriendo el camino para futuros estudios de estas
proteínas como blancos terapéuticos.
Palabras clave en portugues
LeishmaniaProteômica
Electroforese
Espectrometria de massa
Reação em Cadeia da Polimerase
Palabras clave
Leishmaniaproteómica
electroforesis
espectometria de masas
reacción en cadena de la polimerasa
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