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https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/28096
ANÁLISE EPIDEMIOLÓGICA, SOROLÓGICA E GENÉTICA DA HANSENÍASE NO MUNICÍPIO DE RIO BRANCO/AC
Pereira, Ricardo dos Santos | Date Issued:
2018
Author
Advisor
Affilliation
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Abstract in Portuguese
A hanseníase é uma doença infecto-contagiosa crônica, de evolução lenta e formas clínicas distintas, causada pelo Mycobacterium leprae e Mycobacterium lepromatosis, que infectam células nos nervos e na pele. É relatado que animais atuam como reservatórios e podem ser hospedeiros intermediários do bacilo. Entretanto, a transmissão da doença ocorre principalmente pelo contato direto entre pacientes multibacilares e contatos intradomiciliares, onde a principal via de eliminação de bacilos ocorre pelas vias aéreas superiores. Neste trabalho, foram utilizadas estratégias baseadas em métodos epidemiológicos, sorológicos e moleculares para a identificação, a triagem e o diagnóstico precoce de casos novos de hanseníase no município de Rio Branco/AC. A análise epidemiológica da doença no ano de 2016 revelou taxas de detecção altas (1,62/10.000 habitantes), sendo hiperendêmica a taxa de prevalência acumulada (29,76/10.000 habitantes) no período 2006-2016. A análise espacial revelou que houve redução no número de casos novos de hanseníase no triênio 2014-2016, ocorrendo o mesmo para a taxa de detecção média no período. Para avaliar a soropositividade de pacientes e contatos intradomiciliares, foram realizados testes rápidos (NDO-LID e ML-Flow (PGL-1)) em 150 pacientes, 119 contatos e 89 controles. Destes, 53,6% (59/110) foram positivos em pacientes multibacilares e 22,5% (9/40) em pacientes paucibacilares. Nos contatos, 37% (44/119) dos testes foram positivos, sendo considerado muito alto. Para os controles, 30,3% (27/89) dos testes rápidos foram positivos, o que sugere uma alta taxa de infecção e possivelmente uma transmissão ativa da doença A detecção do DNA de M. leprae, a partir de amostras de pacientes (n=213) e contatos (n=213), foi realizada através da qPCR para o gene 16S (rDNA). Das amostras positivas para a qPCR, observada no grupo de estudo mais recente (2016-2017), 19 amostras (86,36%) foram de pacientes multibacilares, 01 amostra (4,5%) de paciente paucibacilar e 02 amostras (9,1%) de contatos. Os resultados obtidos apresentaram 100% de positividade em pacientes multibacilares não-tratados ou no início do tratamento (até três meses). As análises genéticas em relação aos polimorfismos associados à hanseníase, realizadas a partir de um estudo caso-controle, recrutou um total de 768 indivíduos (pacientes (n=157) e controles (n=611)). A genotipagem de polimorfismos para os SNPs dos genes PKLR (rs4620533, rs4971072, rs11264355) e OASL (rs3213545) revelou que não houve uma diferença significativa entre as frequências dos genótipos e alelos no grupo de casos e controles na população estudada. A análise espacial demonstrou que ainda existem muitas áreas hiperendêmicas para a hanseníase, onde pode ser realizada a busca ativa de casos novos. A alta positividade dos testes rápidos em contatos e controles indica a circulação ativa do M. leprae, o que coloca em dúvida sua utilização para a triagem da doença. A análise molecular (qPCR) teve baixa taxa de positividade, mas poderia ser utilizada no rastreamento e diagnóstico precoce da população de risco para a hanseníase. Os loci investigados no estudo genético não replicaram achados anteriores do nosso grupo, demonstrando que são necessários estudos de ancestralidade e a investigação de novas regiões do genoma na tentativa de se definir um painel de SNPs de suscetibilidade à hanseníase.
Abstract
Leprosy is a chronic infectious and slow-evolving disease with distinct clinical forms, caused by Mycobacterium leprae and lepromatosis, which infects cells in the nerves and skin. It is reported that animals act as reservoirs and may be intermediate hosts of the bacillus. However, transmission of the disease occurs mainly through direct contact between multibacillary patients and intradomiciliary contacts, where the main route of elimination of bacilli occurs through the upper airways. In this work, strategies based on epidemiological, serological and molecular methods were used for the identification, screening and early diagnosis of new cases of leprosy in the city of Rio Branco/AC. The epidemiological analysis of the disease in 2016 revealed high detection rates (1.62 / 10,000 inhabitants) and the cumulative prevalence rate (29.76 / 10,000 inhabitants) in the 2006-2016 period was hyperendemic. Spatial analysis revealed that there was a reduction in the number of new leprosy cases in the 2014-2016 triennium, ocurring the same for the mean detection rate in the period. To assess the seropositivity of patients and household contacts, rapid tests (NDO-LID and ML-Flow (PGL-1)) were performed in 150 patients, 119 contacts and 89 controls. Of these, 53.6% (59/110) were positive in multibacillary patients and 22.5% (9/40) in paucibacillary patients. In the contacts, 37% (44/119) of the tests were positive, being considered very high. For the controls, 30.3% (27/89) of the rapid tests were positive, suggesting a high infection rate and possibly an active transmission of the disease Detection of M. leprae DNA, from patient samples (n=213) and contacts (n=213), was performed by qPCR for the 16S gene (rDNA). Of the qPCR-positive samples, 19 samples (86.36%) were from multibacillary patients, 01 sample (4.5%) from paucibacillary patients and 02 samples (9, 1%) of contacts. The results obtained were 100% positive in untreated multibacillary patients or at the beginning of treatment (up to three months). Genetic analysis of leprosy-associated polymorphisms from a case-control study enrolled a total of 768 subjects (patients (n=157) and controls (n = 611)). Genotyping polymorphisms for the SNPs of the PKLR genes (rs4620533, rs4971072, rs11264355) and OASL (rs3213545) revealed that there was no significant difference between genotype and allele frequencies in the casecontrol group in the studied population. Spatial analysis has shown that there are still many hyperendemic areas for leprosy, where active search for new cases can be performed. The high positivity of rapid tests on contacts and controls indicates the active circulation of M. leprae, which calls into question its use for the screening of the disease. Molecular analysis (qPCR) had a low positivity rate, but could be used in the screening and early diagnosis of the population at risk for leprosy. The loci investigated in the genetic study did not replicate previous findings of our group, demonstrating that ancestral studies and the investigation of new regions of the genome are necessary in an attempt to define a panel of SNPs susceptible to leprosy.
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