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ThesisCopyright
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2021-01-01
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AVALIAÇÃO DO CONTROLE DA INFECÇÃO POR LEISHMANIOSE BRAZILIENSIS IN VITRO E IN VIVO PELOS CARREADORES LIPÍDICOS NANOESTRUTURADOS COM ANFOTERICINA B (CLN-ANB)
Macrófago
Autofagia
Vacúolos
Cardiomiopatia chagásica
Terapia celular
Células tronco
Mesenquimais
Leishmaniose visceral
Morte
Prognóstico
Leishmaniose Cutânea
L. braziliensis
Anfotericina B
Tratamento
Macrófago
Macrophage
Autophagy
Vacuoles
Chagas cardiomyopathy
Cell therapy
Trunk cells
Mesenchymal
Visceral leishmaniasis
Death
Prognosis
Cutaneous Leishmaniasis
L. braziliensis
Amphotericin B
Treatment
Macrophage
Silva, Jéssica Rebouças | Date Issued:
2018
Author
Advisor
Comittee Member
Affilliation
Universidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina. Salvador, BA, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil.
Abstract in Portuguese
A leishmaniose visceral (LV) é grave problema de saúde pública no Brasil, onde permanece com elevadas taxas de letalidade a despeito das tentativas de controle. OBJETIVO: Identificar aspectos clínicos e laboratoriais admissionais associados ao óbito na LV. MATERIAIS E MÉTODOS: trata-se de estudo de corte transversal retrospectivo incluindo os pacientes admitidos no Hospital Couto Maia (Salvador/Ba) com diagnóstico de LV entre janeiro de 2010 e dezembro de 2014. Variáveis epidemiológicas, clínicas e laboratoriais admissionais foram coletadas em instrumento padronizado e analisadas no software Stata® versão 13.0 na comparação entre os grupos de desfecho clínico (DC) de alta hospitalar (n=106) ou óbito (n=12). RESULTADOS: Predominaram pacientes do sexo masculino (62,7%), da faixa etária pediátrica (53,4%), de procedência da área urbana de municípios do interior da Bahia com baixo Índice de Desenvolvimento Humano e de apresentação clínica clássica com hepatoesplenomegalia febril e citopenias. A letalidade média foi de 10,2%, superior a partir dos 40 anos de idade. As principais causas de óbito declaradas foram insuficiências renal e hepática/hepatite, sepse/choque séptico, choque não especificado e coagulação intravascular disseminada. Comorbidades ocorreram em 19,5% dos pacientes e foram associadas ao DC óbito (p=0,043), assim como a presença de dor abdominal (p=0,022), sangramentos mucosos (p=0,034), edema (p=0,029), icterícia (p=0,000), redução do sensório (p=0,001), crepitação pulmonar (p=0,014), bulhas arrítmicas (p=0,027), coinfecção bacteriana (p=0,019) e alterações eletrocardiográficas (p=0,001). Apresentaram associação óbito níveis de plaquetas < 81.000/mm³ (p=0,004), albumina ≤ 2,2g/dL (p=0,032), ureia > 37 mg/dL (p=0,009), bilirrubinas totais > 0,9 mg/dL (p=0,001), bilirrubina direta > 0,4mg/dL (p=0,002), atividade de protrombina ≤ 45% (p=0,008) e creatinina elevada para a idade (p=0,003). Os escores obtidos nos modelos prognósticos clínico (EC) e clinicolaboratorial (ECL) adotados pelo Ministério da Saúde do Brasil apresentaram concordância com o DC; EC ≥ 4 e ECL ≥ 6 foram significativamente associados ao óbito nesta amostra, com maior força de associação para o último (p=0,000). CONCLUSÕES: O perfil clínico da amostra foi concordante com a literatura, porém algumas variáveis classicamente associadas ao óbito na LV não se mostraram significantes, ou se fizeram em diferentes pontos de corte, o que pode ter se devido a variações populacionais ou ao delineamento do estudo, requerendo pesquisas mais robustas para a sua verificação. Os resultados para as pontuações nos EC e ECL nesta amostra refletem a importância de sua realização enquanto ferramenta de estratificação de risco dos pacientes diagnosticados com LV. Espera-se que este estudo possa contribuir no diagnóstico situacional da doença na população local e na identificação de questões-chave a serem aprofundadas através de diferentes metodologias.
Abstract
INTRODUCTION. The therapeutic arsenal for treating leishmaniasis has serious limitations,
such as high cost and toxicity. Nanostructured Lipid Carriers (NLCs) are emerging as a
promising approach because of the high drug loading capacity, controlled release profile of the
drugs, greater stability and reduced cost. RESULTS and DISCUSSION. In this work, we
demonstrated for the first time the ability of Nanostructured Lipid Carriers with Amphotericin
B (NLC-AmB) to control L. braziliensis infection in vitro and in vivo. NLC-AmB was less toxic
in relation to free amphotericin (AmB) and amphotericin B deoxycholate (AmB-D) in in vitro
evaluation. The counts of viable promastigotes recovered in the supernatant of infected
macrophages revealed IC50 of 5.3 ± 0.558; 13 ± 0.577 and 11.7 ± 1.73 ng / mL and selectivity
index of 813; 830 and 1046, for AmB, AmB-D and NLC-AmB, respectively. The analysis by
confocal microscopy showed the uptake of the NLCs by infected macrophages already after
one hour of incubation and their greater entry with 48 hours. The immunomodulatory effect of
the formulations was evaluated by the quantification of nitric oxide (NO) and tumor necrosis
factor alpha (TNF-α) in the supernatant of infected macrophages treated with the IC50 of the
formulations. Only AmB was able to induce significantly NO and TNF-α. For in vivo
evaluation, BALB / c mice were infected in the ear dermis with L. braziliensis and treated with
pentavalent antimonial (Sb5+, Glucantime®), liposomal amphotericin B (AmB-L,
Ambisome®) or with NLC-AmB. After six weeks of infection, analysis of lesion size and
parasite load of the infected ear showed similar efficacy between Sb5+ and NLC-AmB when
compared to animals that did not receive treatment. CONCLUSION. The results showed
characteristics regarding the safety and efficacy of NLC-AmB in controlling the infection in
vitro and in vivo by L. braziliensis. Thus, our data suggest that NLC-AmB constitute a
promising new formulation of Amphotericin B for the treatment of Cutaneous Leishmaniasis.
Keywords in Portuguese
LeishmaniaMacrófago
Autofagia
Vacúolos
Cardiomiopatia chagásica
Terapia celular
Células tronco
Mesenquimais
Leishmaniose visceral
Morte
Prognóstico
Leishmaniose Cutânea
L. braziliensis
Anfotericina B
Tratamento
Macrófago
Keywords
LeishmaniaMacrophage
Autophagy
Vacuoles
Chagas cardiomyopathy
Cell therapy
Trunk cells
Mesenchymal
Visceral leishmaniasis
Death
Prognosis
Cutaneous Leishmaniasis
L. braziliensis
Amphotericin B
Treatment
Macrophage
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