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https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/32280
Tipo
ArtículoDerechos de autor
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Fecha del embargo
2022-01-01
Colecciones
- IOC - Artigos de Periódicos [12500]
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DIRECT DETECTION OF UNDERIVATIZED CHITOOLIGOSACCHARIDES PRODUCED THROUGH CHITINASE ACTION USING CAPILLARY ZONE ELECTROPHORESIS
Quito Oligossacarídeos
Capacitively coupled contactless conductivity detection
Chitinase
Chitooligosaccharides
Autor
Afiliación
Universidade de São Paulo. Instituto de Química. Departamento de Química. São Paulo, SP, Brasil.
Universidade de São Paulo. Instituto de Química. Departamento de Química. São Paulo, SP, Brasil.
Universidade de São Paulo. Instituto de Química. Departamento de Bioquímica. São Paulo, SP, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de janeiro, RJ, Brasil.
Universidade de São Paulo. Instituto de Química. Departamento de Química. São Paulo, SP, Brasil.
Universidade de São Paulo. Instituto de Química. Departamento de Bioquímica. São Paulo, SP, Brasil.
Universidade de São Paulo. Instituto de Química. Departamento de Bioquímica. São Paulo, SP, Brasil.
Universidade de São Paulo. Instituto de Química. Departamento de Química. São Paulo, SP, Brasil.
Universidade de São Paulo. Instituto de Química. Departamento de Química. São Paulo, SP, Brasil.
Universidade de São Paulo. Instituto de Química. Departamento de Bioquímica. São Paulo, SP, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de janeiro, RJ, Brasil.
Universidade de São Paulo. Instituto de Química. Departamento de Química. São Paulo, SP, Brasil.
Universidade de São Paulo. Instituto de Química. Departamento de Bioquímica. São Paulo, SP, Brasil.
Universidade de São Paulo. Instituto de Química. Departamento de Bioquímica. São Paulo, SP, Brasil.
Universidade de São Paulo. Instituto de Química. Departamento de Química. São Paulo, SP, Brasil.
Resumen en ingles
Capillary electrophoresis with capacitively coupled contactless conductivity detection was successfully used to quantify N-acetylglucosamine and five N-acetyl-chitooligosaccharides (C2-C6) produced after reaction with a purified chitinase (TmChi) from Tenebrio molitor (Coleoptera). No derivatization process was necessary. The separation was developed using 10 mM NaOH with 10% (v/v) acetonitrile as background electrolyte and homemade equipment with a system that avoids the harmful effect of electrolysis. The limit of detection for all oligosaccharides was ca. 3microM, and the results indicated that the larger the oligosaccharide, the higher the sensitivity. Analysis of the chitooligosaccharides produced revealed that TmChi has an endolytic cleavage pattern with C5 as the best substrate (higher catalytic efficiency kcat/KM) releasing C2 and C3.
Palabras clave en portugues
Detecção de condutividade sem contato acoplada capacitivamenteQuito Oligossacarídeos
Palabras clave en ingles
Capillary electrophoresisCapacitively coupled contactless conductivity detection
Chitinase
Chitooligosaccharides
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