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PAPEL DAS MOLÉCULAS CO-ESTIMULATÓRIAS NA IMUNOMODULAÇÃO DA LEISHMANIOSE TEGUMENTAR HUMANA
Citocinas
Imunomodulação
Leishmania
Citometria de Fluxo
Cytokines
Imunomodulation
Leishmaniasis
Flow Cytometry
Favali, Cecilia Beatriz Fiuza | Fecha del documento:
2003
Orientador
Miembros de la junta
Afiliación
Universidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina. Salvador, BA, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil.
Resumen en portugues
A leishmaniose humana apresenta um amplo espectro de manifestações clínicas que variam desde a forma cutânea localizada ate a forma com comprometimento visceral. O presente trabalho foi desenvolvido com o objetivo de avaliar o papel de moléculas co-estimulatórias na Ieishmaniose humana. Assim, verificou-se 0 efeito destas moléculas na produção de citocinas ( TNF-a, IFN-y e IL-10) e caracterização fenotípica por citometria de fluxo de células de pacientes com a forma tegumentar da doença. Pacientes da área endêmica de Jequié - SA foram avaliados por exame clínico, Teste de Montenegro (DTH) e histopatologia. Células mononucleares de sangue periférico (CMSP) foram obtidas e plaqueadas numa concentração de 5x106/ml para coleta de sobrenadante e a dosagem de citocinas foi realizada pela técnica de ELISA. A analise fenotípica dos Iinfócitos T foi realizada por citometria de f1uxo, coletando-se as células e marcando-as com anticorpos conjugados a fluorocromos (CD4, CD8, CD25 e CTLA4). As células de pacientes com leishmaniose tegumentar foram estimuladas com antígeno solúvel de Leishmania (SLA 10 μg/ml) com ou sem a adição de CTLA4 solúvel (para bloquear a interação CD28-B7) ou anti-CD40L (para bloquear a interação CD40¬-CD40L). Os resultados encontrados demonstram que 0 bloqueio da interação CD28-B7, via CTLA4 solúvel inibe a produção das citocinas IFN-y, IL-10, IL-12 e TNF-a. Este efeito e mais pronunciado nos pacientes que apresentam duração da Iesão inferior a sessenta dias. Por outro lado, a interação CD40-CD40L parece não ser essencial na imunomodulação da leishmaniose tegumentar humana, já que não foram observadas alterações significativas na produção de citocinas quando se utilizou 0 anticorpo anti-CD40L. Não se verificou alteração significativa no padrão fenotípico de células CD4+ e CD8+ quanta aos marcadores de ativação recente (CD 25) nem quanto à expressão de CTLA4.
Resumen en ingles
A leishmaniose humana apresenta um ampio espectro de manifestações clínicas que variam desde a forma cutánea localizada até a forma com comprometimento visceral. O presente trabalho foi desenvolvido com o objetivo de avaliar o papel de moléculas co-estimulatórias na leishmaniose humana. Assim, verificou-se o efeito destas moléculas na produção de citocinas ( TNF-a, IFN^ e IL-10) e caracterização fenotlpica por citometria de fluxo de células de pacientes com a fonna tegumentar da doença. Pacientes da área endémica de Jequié - BA foram avaliados por exame clínico, Teste de Montenegro (DTH) e histopatologia. Células mononucleares de sangue periférico (CMSP) foram obtidas e plaqueadas numa concentração de 5x10®/ml para coleta de sobrenadante e a dosagem de citocinas foi realizada pela técnica de ELISA. A análise fenotípica dos linfócitos T foi realizada por citometria de fluxo, coletando-se as células e marcando-as com anticorpos conjugados a fiuorocromos (CD4, CD8, CD25 e CTLA4). As células de pacientes com leishmaniose tegumentar foram estimuladas com antígeno solúvel de Leishmania (SLA 10 ng/ml) com ou sem a adição de CTLA4 solúvel (para bloquear a interação CD28-B7) ou anti-CD40L (para bloquear a interação CD40- CD40L). Os resultados encontrados demonstram que o bloqueio da interação CD28-B7, vía CTLA4 solúvel inibe a produção das citocinas IFN^ , IL-10, IL-12 e TNF-a. Este efeito é mais pronunciado nos pacientes que apresentam duração da lesão inferior a sessenta dias. Por outro lado, a interação CD40-CD40L parece não ser essencial na imunomodulação da leishmaniose tegumentar humana, já que não foram observadas alterações significativas na produção de citocinas quando se utilizou o anticorpo anti-CD40L. Não se verificou alteração significativa no padrão fenotípico de células CD4* e CDS'" quanto aos marcadores de ativação recente (CD 25) nem quanto à expressão de CTLA4.
Palabras clave en portugues
Leishmaniose CutâneaCitocinas
Imunomodulação
Leishmania
Citometria de Fluxo
Palabras clave en ingles
Tegumentary leishmaniasisCytokines
Imunomodulation
Leishmaniasis
Flow Cytometry
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