Advisor | Gomes, Yara de Miranda | pt_BR |
Advisor | Abath, Frederico Guilherme Coutinho | pt_BR |
Advisor | Souza, Wayner Vieira de | pt_BR |
Author | Cavalcanti, Milena de Paiva | pt_BR |
Access date | 2012-05-07T14:40:40Z | |
Available date | 2012-05-07T14:40:40Z | |
Document date | 2008 | pt_BR |
Citation | CAVALCANTI, Milena de Paiva. Desenvolvimento e avaliação de um sistema baseado em PCR em tempo real para o diagnóstico da infecção por Leishmania (Leishmania) infantum em cães. 2008. 139 f. Tese (Doutorado em Saúde Pública) - Fundação Oswaldo Cruz, Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães, Recife. 2008. | |
URI | https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/3902 | |
Abstract in Portuguese | O diagnóstico precoce da leishmaniose visceral (LV) é importante para evitar danos severos que podem levar o paciente à morte. Neste contexto, os métodos moleculares vêm sendo desenvolvidos com destaque para a tecnologia da reação em cadeia da polimerase (PCR). Recentemente, a PCR apresentou um significativo avanço em sua tecnologia; é a PCR quantitativa em tempo real (qPCR). Objetivouse desenvolver e avaliar um sistema baseado em qPCR para o diagnóstico da infecção por Leishmania infantum em cães, bem como efetuar uma análise comparativa com a PCR convencional utilizada no Serviço de Referência em Leishmanioses de Pernambuco. Com base na seqüência NCBI Z35273.1 de L. infantum disponível no BLAST-NCBI foram desenhados primers específicos para o complexo L. donovani. A combinação dos primers gerou sistemas de detecção, sendo o sistema Linf 1 B o mais promissor. A curva-padrão foi gerada resultando em limite de detecção de 10 fg de DNA genômico de L. infantum (7x10-2 parasitas), e = 0.9417, R2= 0.931 e slope= -3.47. O sistema desenvolvido foi avaliado em sangue de cães positivos e negativos para leishmaniose visceral canina, apresentando sensibilidade de 100 por cento e especificidade de 83,33 por cento. A análise comparativa com o PCR convencional mostrou que, utilizando-se amostras de sangue, o qPCR é mais sensível (sensibilidade PCR= 23,8 por cento, qPCR= 100 por cento). Em relação à especificidade, apesar da PCR convencional ter apresentado valor de 100 por cento, as análises por meio dos intervalos de confiança e o teste 2? mostraram que os dois testes (PCR convencional e qPCR) são equivalentes. Desta forma, conclui-se que os resultados obtidos para o sistema de qPCR, em amostra de sangue de cães e, a análise comparativa com a PCR convencional (RV1/RV2), sugerem sua utilização nas rotinas de diagnóstico da infecção por L. infantum | pt_BR |
Language | por | pt_BR |
Rights | open access | |
Subject in Portuguese | Leishmaniose visceral | pt_BR |
Subject in Portuguese | Leishmania infantum | pt_BR |
Subject in Portuguese | Reação em cadeia da polimerase | pt_BR |
Subject in Portuguese | Primers do DNA | pt_BR |
Subject in Portuguese | Diagnóstico | pt_BR |
Title | Desenvolvimento e avaliação de um sistema baseado em PCR em tempo real para o diagnóstico da infecção por Leishmania (Leishmania) infantum em cães | pt_BR |
Alternative title | Development and evaluation of system based on real-time in PCR for the diagnosis of Leishmania (Leishmania) infantum infection in dogs | pt_BR |
Type | Thesis | pt_BR |
Departament | Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães | pt_BR |
Defense Institution | Fundação Oswaldo Cruz | pt_BR |
Degree level | Doutor | pt_BR |
Place of Defense | Recife/PE | pt_BR |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Aggeu Magalhães. Recife, PE, Brasil. | |