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https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/39434
VALIDAÇÃO DE MÉTODO ANALÍTICO PARA A DETERMINAÇÃO DE TUBERCULOSTÁTICOS EM FORMULAÇÃO DE DOSE FIXA COMBINADA POR ELETROFORESE CAPILAR
Rifampicina
Eletroforese Capilar
Validação
Controle de Qualidade
Vigilância Sanitária
Rifampicin
Capillary Electrophoresis
Validation
Quality control
Health Surveillance
Rifampicina
Eletroforese Capilar
Estudos de Validação como Assunto
Metodologia
Vigilância Sanitária
Controle de Qualidade
Castex, Monica de Gouveia | Date Issued:
2015
Author
Comittee Member
Affilliation
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Abstract in Portuguese
A Organização Mundial de Saúde (OMS) propôs o protocolo de tratamento quimioterápico padrão para a tuberculose utilizando associações de fármacos formulados em doses fixas e adequadas conforme a fase da doença e faixa de peso do paciente. Essa medida visou reduzir a ocorrência de novos casos da doença e minimizar o desenvolvimento de resistência aos medicamentos envolvidos na terapia. Nessas associações, a isoniazida e a rifampicina estão sempre presentes. Frente a essa demanda, a indústria farmacêutica busca continuamente manter a qualidade dos produtos antituberculose assegurando cumprir as exigências relativas ao registro sanitário e a sua responsabilidade legal com a segurança, qualidade e eficácia dos medicamentos. Dessa forma, é necessária a prática de um sistema que incorpore as Normas de Boas Práticas de Fabricação e de Laboratório, nas quais os estudos da validação constituem parte essencial desse processo. Ao mesmo tempo, para o combate de uma doença como a tuberculose, cujo custeio se faz gratuitamente pelo Sistema Único de Saúde, a disponibilização de metodologias analíticas confiáveis, rápidas, de baixo custo e menos poluentes, mostra-se extremamente interessante ao orçamento público, particularmente no Brasil, que galgou a sexta colocação no ranking dos maiores consumidores de medicamentos no mundo. A eletroforese capilar (EC) é uma ferramenta analítica que vem se desenvolvendo rapidamente nas últimas duas décadas, por ser uma técnica de alto desempenho e baixo custo, requerer menor volume de amostra e exigir pouca ou nenhuma utilização de solventes orgânicos, além de baixo impacto ambiental. Neste trabalho realizou-se a validação de uma metodologia para análise de isoniazida e rifampicina em comprimidos de Doses Fixas Combinadas (DFC) por EC. As condições da EC foram: capilar de sílica fundida recoberto com poliimida de 64,5 cm de comprimento total (56 cm de comprimento efetivo) e 50 µm de diâmetro interno; tensão: 20 kV; temperatura do cassete: 25 ˚C; varredura Detector por Arranjo de Diodos - (DAD): monitorando o comprimento de onda de 200 nm; introdução das amostras: hidrodinâmica por pressão a 25 mbar/3s de amostra, seguida de 25 mbar/2s de eletrólito. Eletrólitos: soluções contendo 60 mM de borato de sódio pH 9,85. A metodologia analítica empregada provou ser aplicável para a determinação quantitativa de isoniazida e rifampicina nos comprimidos de DFC. Comprovou-se que a faixa de trabalho é linear para o intervalo de concentração de 200 a 700 µg/mL e 500 a 1000 µg/mL para isoniazida e rifampicina, respectivamente. A matriz do comprimido 2 em 1 não influencia nas respostas obtidas para análise de isoniazida e rifampicina. A repetibilidade da rifampicina e isoniazida de 3,17 % e 2,64 %, respectivamente, foram aceitáveis quando comparadas com o critério de aceitação de 3,30 % obtido para o coeficiente de variação de repetibilidade calculado pela equação de Horwitz. A precisão intermediária da isoniazida e rifampicina de 1,41 % e 1,67 %, respectivamente, foram aceitáveis quando comparadas ao coeficiente de variação de reprodutibilidade de 1,97 % e 1,67 % para isoniazida e rifampicina, respectivamente, calculados pela equação de Horwitz. As faixas de recuperação de 92,16-95,00 % para isoniazida e 97,59-98,41 % para rifampicina foram aceitáveis para o critério de aceitação do International Conference Harmonization.
Abstract
The World Health Organization (WHO) has proposed a standard therapeutic protocol for tuberculosis using associations of drugs formulated in fixed and appropriated doses according to the disease’s phase and weight range of patients. This guidance aimed to reduce the occurence of new cases and to minimize the developlment of resistance to the drugs involved in this therapy. In this associations, isoniazide and rifampicin are always present. Due to this demand, pharmaceutical industry searchs continually keeping the quality of antituberculosis products in order to fulfill the requirements of sanitary registration and the legal responsibility with safety, quality and efficacy of medications. Therefore, it is necessary the practice of a system that joins the good manufacturing and laboratory practices in which the validation studies compose a primary role of this process. At the same time, to fight such a disease like tuberculosis, which is funded by the public health system, the availability of analytic methodologies that are reliable, short time, low cost and less pollutant show to be extremely important to the public budget, particularly in Brazil, that has achieved the sixth position of world drugs market. As Capillary Electrophoresis (CE) is an analytic tool that has been rapidly growing in the last decades for being a technique of high performance, low cost, low volume samples, low organic solvents consumption and low environmental impact, this study validated a methodology for the analysis of isoniazide and rifampicin in tablets of Fixed Dose Combination (FDC) by CE. The conditions of CE were: capillary of fused silica covered with pollyimide of 64.5 cm of total length (56 cm of effective length) and 50 µm of internal diameter; 20 kV voltage; 25°C cassette temperature; Diode Array Detector (DAD) scan monitoring the wavelength of 200 nm; inserting samples by hydrodynamic of pressure of 25 mbar/3s of sample, followed of 25 mbar/2s of electrolyte. Electrolyc solutions containing 60 mM of sodium borate pH 9.85. The analytic methodology proved to be useful for quantitative determination of isoniazide and rifampicin in FDC tablets. It was proved that the working range is linear for the concentration interval of 200 to 700 µg/mL and 500 to 1000 µg/mL for isoniazide and rifampicine, respectively. The matrix of 2 in 1 tablet does not interfere the results for the analysis of isoniazide and rifampicine. Repeatability of rifampicine and isoniazide of 3.17 % and 2.64 %, respectively were acceptable when compared by the acceptance criterion of 3.30 % for variation coefficient of repeatability calculated by Horwitz equation. Intermediate precision of isoniazide and rifampicine of 1.41 % and 1.67 %, respectively were acceptable when compared to the variation coefficient of reprodutibility of 1.97 % and 1.67 % for isoniazide and rifampicine, respectively, calculated by Horwitz equation. Recuperation range of 92.16 – 95.00 % for isoniazide and 97.59 – 98.41 % for rifampicine were acceptable for the criterion of acceptance of the International Conference Harmonization.
Keywords in Portuguese
IsoniazidaRifampicina
Eletroforese Capilar
Validação
Controle de Qualidade
Vigilância Sanitária
Keywords
IsoniazideRifampicin
Capillary Electrophoresis
Validation
Quality control
Health Surveillance
DeCS
IsoniazidaRifampicina
Eletroforese Capilar
Estudos de Validação como Assunto
Metodologia
Vigilância Sanitária
Controle de Qualidade
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