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https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/44336
CARACTERIZAÇÃO DA PROTEÍNA NUCLEOLAR NOP 16 NA FISIOLOGIA DO PATÓGENO CRYPTOCOCCUS GATTII
Proteínas Nucleares
Fenômenos Fisiológicos Celulares
Patogenicidade
Patogênese
Castelli, Rafael Fernando | Date Issued:
2020
Author
Advisor
Affilliation
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Carlos Chagas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Abstract in Portuguese
Atualmente, estima-se que cerca de 300 milhões de pessoas sejam acometidas por doenças fúngicas anualmente em todo o globo. Espécies de Aspergillus, Candida e Cryptococcus são os principais causadores de micoses que afetam, em especial, indivíduos imunossuprimidos. Espécies de C. neoformans e C. gattii se destacam como agentes causadores da criptococose, uma micose sistêmica e invasiva que pode atingir o sistema nervoso central e, se não tratada rapidamente, pode levar à morte. Em estudos anteriores, nosso grupo sugeriu que o gene NOP16 tem potencial para representar um alvo para agentes antifúngicos. Nesse estudo, buscamos entender o papel de Nop16 na fisiologia de C. gattii através da caracterização dos efeitos da deleção do gene NOP16 nas características fenotípicas e patogênicas de C. gattii. Análises por microscopia óptica, de fluorescência, eletrônica de varredura e de transmissão, combinadas com ensaios sorológicos e de interação com fagócitos, demonstraram que a deleção do gene acarreta sutis alterações no tamanho da cápsula polissacarídica, na taxa de fagocitose e na secreção de GXM. Entretanto, o estudo de vesículas extracelulares (EVs) por microscopia eletrônica de transmissão e por rastreamento de nanopartículas revelou que mutantes deficientes na expressão do gene NOP16 tiveram capacidade reduzida de produzir EVs. Esse fenótipo foi acompanhado de uma reduzida capacidade de levar à morte larvas de Galleria mellonella. Esses resultados indicam que Nop16 é um elemento importante na fisiologia e na patogênese de C. gattii.
Abstract
It is currently estimated that approximately 300 million people are annually affected by fungal diseases across the globe. Species of Aspergillus, Candida and Cryptococcus are the main causes of mycoses that particularly affect immunosuppressed individuals. Species of C. neoformans and C. gattii are the causative agents of cryptococcosis, a systemic and invasive mycosis that can reach the central nervous system and, if not treated immediately, can lead to death. In previous studies, we suggested that the NOP16 gene has the potential to represent a target for antifungal agents. In this study, we wanted to understand the role of Nop16 in the physiology of C. gattii through the characterization of the effects of the deletion of the NOP16 gene on the phenotypic and pathogenic traits of C. gattii. Combined analyses of optical, fluorescence, scanning and transmission electron microscopy, in association with serological tests and interaction with phagocytes revealed that deletion of the gene causes subtle changes in the size of the polysaccharide capsule, the rate of phagocytosis and the secretion of GXM. However, the study of extracellular vesicles (EVs) by transmission electron microscopy combined with nanoparticle tracking analysis revealed that mutants deficient in NOP16 expression had a reduced ability to produce EVs. This phenotype was accompanied by a reduced ability to kill larvae of Galleria mellonella. These results indicate that Nop16 is an important element in the physiology and pathogenesis of C. gattii.
Keywords in Portuguese
Nop16DeCS
Cryptococcus gattiiProteínas Nucleares
Fenômenos Fisiológicos Celulares
Patogenicidade
Patogênese
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