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RESPOSTA IMUNE INATA A INFECÇÃO PELO VÍRUS CHIKUNGUNYA: SUBPOPULAÇÃO DE MONÓCITOS E FATORES ANTIVIRAIS
Imunidade Inata
Monócitos
Receptor 2 Toll-Like
Receptor 4 Toll-Like
Receptor 7 Toll-Like
Citocinas
Santos, Caroline Fernandes dos | Fecha del documento:
2019
Orientador
Miembros de la junta
Afiliación
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Resumen en portugues
Células e moléculas sinalizadoras da resposta imune inata são as principais responsáveis pela defesa inicial dos organismos contra agentes invasores. Dentre os leucócitos responsáveis pela imunidade inata estão os monócitos - população relacionada a infecções bacterianas e virais. Existem três subclassificações de monócitos (clássicos, intermediários e não clássicos) que parecem responder de maneira heterogênea aos diferentes patógenos. É através de PRRs - reconhecendo PAMPs - que ocorre a ativação celular e transcrição de fatores que culminam na produção de citocinas e quimiocinas. Dentre os PRRs destaca-se a superfamília dos TLRs, onde o TLR7 e mais recentemente os TLR2 e TLR4, desempenham papel importante no curso das infecções virais levando a produção de IFNs, além das outras moléculas pró-inflamatórias responsáveis pela lise de células infectadas, recrutamento de outros subtipos celulares e clearance viral. O CHIKV é uma arbovirose transmitida principalmente pelo A. aegypti que teve sua chegada ao Brasil nos últimos anos, causando epidemias caracterizadas por mialgia, febre, manifestações cutâneas e dores articulares incapacitantes que podem se estender por meses ou anos. Ainda não está claro quais são os mecanismos para o aparecimento de sintomas tão intensos e estabelecimento de quadros crônicos. Também pouco se sabe sobre o estado imunológico de pacientes coinfectados com o vírus CHIKV e outros arbovirus em circulação no país tais como o ZIKV e DENV. Assim, o objetivo desse trabalho foi avaliar a resposta imune antiviral através da caracterização de subpopulações de monócitos e seu padrão de ativação em pacientes infectados com CHIKV, nas diferentes fases da doença, e em pacientes co-infectados; além de avaliar a produção de mediadores antivirais e inflamatórios Analisando as células de pacientes naturalmente infectados pelo CHIKV e apresentando co-infecções, observamos que há aumento na frequência de monócitos intermediários em pacientes mono e coinfectados com CHIKV em relação aos controles. Também demonstramos aumento da expressão de CD163 e HLA-DR nessa mesma subpopulação em todos os grupos de pacientes. As análises da expressão de TLR2 e TLR4 mostraram que esses TLRs estão aumentados em monócitos clássicos e intermediários em pacientes apresentando coinfecção com o CHIKV. No entanto, a subpopulação de monócitos não-clássicos apresentou baixa expressão de TLR2 e TLR7 na fase crônica da infecção. A quantificação da carga viral dos pacientes monoinfectados com CHIKV demonstrou que é possível detectar vírus circulante após três meses de doença. Comparamos fatores solúveis plasmáticos de controles sadios e pacientes infectados pelo CHIKV. Observamos baixas dosagens dos IFNs \03B1/\03B3 assim como do TNF-\03B1 nos pacientes. Demonstramos elevadas dosagens plasmáticas das quimiocinas CCL2, CCL4, CXCL8 e CXCL10 durante a fase aguda da infecção, corroborando com os quadros inflamatórios vistos na clínica. Baixas dosagens de CCL5 e EGF foram encontradas na fase aguda. Interessantemente, elevadas dosagens de CCL5 foram encontradas nos casos crônicos. Juntos, os resultados demonstram que as subpopulações de monócitos se ativam de maneira diferente em resposta a infecção pelo CHIKV e que o vírus parece estar promovendo ativação celular e modulando a expressão de citocinas com papel antiviral efetivo
Resumen en ingles
Cells and molecules that signal innate immune responses are primarily responsible for the initial defense of organisms against invading agents. Among the leukocytes responsible for innate immunity are monocytes - a population suffering from bacterial and viral infections. Monocytes are subclassified into 3 groups (classical, intermediate and non-classical) that appear to respond heterogeneously to different pathogens. It is through PRRs - recognizing PAMPs - that occurs with cellular activity and transcription of factors that culminate in the production of cytokines and chemokines. Among PRRs, the TLR superfamily can be highlighted, where TLR7 and more recently TLR2 and TLR4 play an important role in the course of viral infections. They lead to the production of IFNs in addition to the other proinflammatory molecules responsible for lysis of infected cells, recruitment of other cell subtypes, and viral release. CHIKV is a arbovirus transmitted by A. aegypti that has arrived in Brazil in recent years, causing myalgia, fever, skin manifestations and disabling joint pain that may extend for months or years. The mechanisms for the ocorrence of such intense symptoms and establish ment of chronic conditions are still unclear. Also, little is known about the immune status of patients who are co-infected with CHIKV virus and other arboviroses circulating in the country (ZIKV and DENV). Thus, the aim of this study was to evaluate the anti-virus immune response of monocyte subpopulations and their activation pattern in CHIKVinfected patients, at different stages of the disease, and in patients co-infected with viruses; besides that we aim to evaluate the production of inflammatory mediators After, analyzing the cells from naturally CHIKV-infected and co-infected patients we observed that there is an increase in the frequency of intermediate monocytes in CHIKV mono and co-infected patients compared to controls. We also demonstrated an increase in CD163 and HLA-DR expression in this same subpopulation in all patient groups. Regarding the analysis of TLR2 and TLR4 expression, these TLRs are increased in classical monocytes (TLR2) and intermediates in patients with CHIKV co-infection. However, a subpopulation of non-classical monocytes showed a decrease in TLR2 in the chronic phase, and was the same also seen for TLR7. By analyzing the plasma-soluble factors in these patients, we quantified the viral load from CHIKV monoinfected patients and showed that circulating virus could be detected after three months of disease. In relation to cytokines, IFNs and TNF-\03B1 levels are decrease in CHIKV + patients, suggesting low antiviral activity. We have shown that pro-inflammatory chemokines are increased during virus infection, confirming the inflammatory conditions seen in patients. Together, the results demonstrated as monocyte subpopulations are activated differently in response to CHIKV infection and that viruses appear to be promoting cellular activity and modulating cytokine expression with effective antiviral role
DeCS
Vírus ChikungunyaImunidade Inata
Monócitos
Receptor 2 Toll-Like
Receptor 4 Toll-Like
Receptor 7 Toll-Like
Citocinas
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