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Orientador | Melo, Fábio Lopes de | |
Orientador | Silva, Maria Almerice Lopes da Silva | |
Autor | Aquino, Ana Emília Costa Araújo de. | |
Fecha de acceso | 2022-06-15T16:22:44Z | |
Fecha de disponibilización | 2022-06-15T16:22:44Z | |
Fecha de publicación | 2020 | |
Referencia | AQUINO, Ana Emília Costa Araújo de.. Aplicação da técnica de amplificação isotérmica em alça (LAMP) para o diagnóstico da Leishmaniose visceral. 2020. 70 p:. Dissertação, (Mestrado)-Instituto Aggeu Magalhães, Fundação Oswaldo Cruz, Recife, 2020. | pt_BR |
URI | https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/53279 | |
Resumen en Portugués | A Leishmaniose Visceral (LV) é uma infecção causada por protozoários do complexo Leishmania donovani, no Brasil o agente etiológico é a espécie Leishmania infantum, e encontra-se entre as seis endemias consideradas prioritárias no mundo. O diagnóstico precoce desta parasitose é de grande importância, pois quando não tratados ou tratados tardiamente os casos têm maior letalidade. A visualização do parasito em amostras de punção de medula óssea é definida como método de diagnóstico padrão ouro, entretanto, é considerado um procedimento invasivo e necessita de ambiente adequado e profissionais capacitados. A técnica de Amplificação Isotérmica em Alça (LAMP) é um teste molecular de amplificação de DNA que não requer o uso de termocicladores, podendo ser realizado em banho-maria, pois toda a reação acontece a uma temperatura constante. Tendo em vista todas as vantagens do método LAMP, este estudo propôs a otimização e aplicação desta técnica para diagnóstico da LV em indivíduos residentes no município de Tamandaré, no estado de Pernambuco. Nesta pesquisa, foram coletadas amostras de sangue periférico de 83 indivíduos residentes do município em questão. Nos ensaios de otimização do LAMP foi avaliada a sensibilidade, sendo possível detectar o DNA de Leishmania infantum até a concentração de 100ag e, nos ensaios de especificidade, apenas amostras contendo DNA de Leishmania infantum foram positivas. Quando o sistema LAMP foi aplicado para o diagnóstico da LV nas amostras coletadas, não houve resultados positivos. Na aplicação da Reação em Cadeira da Polimerase (PCR) utilizando o sistema ITS1 para diagnóstico da LV, todos os pacientes também foram negativos. A partir desta pesquisa, o sistema de LAMP pode ser considerado sensível e específico para detecção molecular de DNA de Leishmania infantum no Brasil. Estudos posteriores aplicando amostras clínicas positivas são necessários afim de definir a sensibilidade e especificidade analítica deste sistema . | pt_BR |
Idioma | por | pt_BR |
Derechos de autor | open access | pt_BR |
Palabras clave en Portugués | Leishmaniose visceral | pt_BR |
Palabras clave en Portugués | Leishmania infantum | pt_BR |
Palabras clave en Portugués | Técnicas de Amplificação de Ácido Nucleico | pt_BR |
Título | Aplicação da técnica de amplificação isotérmica em alça (LAMP) para o diagnóstico da Leishmaniose visceral | pt_BR |
Tipo del documento | Dissertation | pt_BR |
Fecha de la defesa | 2020-06-16 | |
Departamiento | Instituto Aggeu Magalhães | pt_BR |
Instituición de defensa | Fundação Oswaldo. Instituto Aggeu Magalhães. | pt_BR |
Grau | Mestrado Acadêmico | pt_BR |
Local de defensa | Recife/PE | pt_BR |
Programa | Programa de Pós-Graduação em Biociências e Biotecnologia em Saúde | pt_BR |
Resumen en Inglés | The Visceral Leishmaniasis (VL) is an infection caused by protozoa from the Leishmania donovani complex and is among the six endemic diseases considered to be priority in the world. The early diagnosis of this parasitosis is of great importance, because when untreated or treated late, the cases are more lethal. The visualization of the parasite in bone marrow puncture samples is defined as a gold standard diagnostic method, however, it is considered an invasive procedure and requires an adequate environment and trained professionals. The Loop Isothermal Amplification (LAMP) technique is a molecular DNA amplification test that does not require the use of thermocyclers, and can be performed in a water bath, as the entire reaction takes place at a constant temperature. In view of all the advantages of the LAMP method, this study proposed the optimization and application of this technique for the diagnosis of VL in individuals living in the municipality of Tamandaré, in the state of Pernambuco. In this research, peripheral blood samples were collected from 83 individuals living in the municipality in question. In the LAMP optimization assays the sensitivity was evaluated, being possible to detect the Leishmania infantum DNA up to the concentration of 100 ag and, in the specificity tests, only samples containing Leishmania infantum DNA were positive. When the LAMP system was applied for the diagnosis of VL in the collected samples, there were no positive results. In the application of the Polymerase Chair Reaction (PCR) using the ITS1 system for the diagnosis of VL, all patients were also negative. From this research, the LAMP system can be considered sensitive and specific for molecular detection of Leishmania infantum DNA in Brazil. Further studies using positive clinical samples are necessary in order to define the sensitivity and analytical specificity of this system . | pt_BR |
Afiliación | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Aggeu Magalhães. Recife, PE, Brasil. | pt_BR |
Palavras clave en Inglês | Visceral leishmaniasis | pt_BR |
Palavras clave en Inglês | Leishmania infantum | pt_BR |
Palavras clave en Inglês | Amplification Techniques Nucleic Acid | pt_BR |
Palavras clave | Leishmaniasis visceral | pt_BR |
Palavras clave | Leishmania infantum | pt_BR |
Palavras clave | Técnicas de amplificación Ácido nucleico | pt_BR |
Palavras clave en Francês | Leishmaniose viscérale | pt_BR |
Palavras clave en Francês | Leishmania infantum | pt_BR |
Palavras clave en Francês | Techniques d'amplification Acide nucléique | pt_BR |
DeCS | Leishmaniose visceraldiagnóstico | pt_BR |
DeCS | Leishmania infantum | pt_BR |
DeCS | Técnicas de Amplificação de Ácido Nucleicométodos | pt_BR |
DeCS | Sensibilidade e Especificidade | pt_BR |
DeCS | Leishmania infantumisolamento & purificação | pt_BR |
DeCS | Técnicas de Diagnóstico Molecular | pt_BR |