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Autor | Silva, Andressa Noronha Barbosa da | |
Autor | Souza, Rita de Cássia Moreira de | |
Autor | Honorato, Nathan Ravi Medeiros | |
Autor | Martins, Rand Randall | |
Autor | Câmara, Antônia Claudia Jácome da | |
Autor | Galvão, Lúcia Maria da Cunha | |
Autor | Chiari, Egler | |
Fecha de acceso | 2023-05-25T19:48:57Z | |
Fecha de disponibilización | 2023-05-25T19:48:57Z | |
Fecha de publicación | 2020 | |
Referencia | SILVA, Andressa Noronha Barbosa da et al. Comparison of phenol-chloroform and a commercial deoxyribonucleic acid extraction kit for identification of bloodmeal sources from triatomines (Hemiptera: Reduviidae). Rev Soc Bras Med Trop., v. 53, e20200189, 2020. doi: 10.1590/0037-8682-0189-2020. | en_US |
ISSN | 0037-8682 | en_US |
URI | https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/58732 | |
Idioma | eng | en_US |
Editor | Sociedade Brasileira de Medicina Tropical | en_US |
Derechos de autor | open access | en_US |
Título | Comparison of phenol-chloroform and a commercial deoxyribonucleic acid extraction kit for identification of bloodmeal sources from triatomines (Hemiptera: Reduviidae) | en_US |
Tipo del documento | Article | en_US |
DOI | 10.1590/0037-8682-0189-2020 | |
Resumen en Inglés | Introduction: Knowledge of triatomine bloodmeal sources is essential for understanding vector-host interactions in Trypanosoma cruzi transmission cycles. Expensive commercial deoxyribonucleic acid (DNA) extraction kits are widely used for bloodmeal identification. This study assessed the performance of an inexpensive phenol-chloroform DNA extraction protocol for identification of triatomine bloodmeal sources, comparing it with a conunercially available kit. Methods: Both methods were used to obtain DNA from the intestinal contents of Triatoma brasiliensis blood-fed on either Columba sp., Alus musculus, or Gallus gallus. Subsequently, the mitochondria] 12S ribosomal ribonucleic acid (rRNA) gene was amplified by polymerase chain reaction, sequenced, and compared with GenBank data. Results: Twelve (80%) samples extracted with the commercial kit and four (26.7%) with phenol-chloroform were pure (according to the A260/A280 ratio). Samples extracted with phenol-chloroform, except for Columba sp. samples, had higher DNA concentration than those extracted with the commercial kit. Samples extracted using phenol-chloroform and blood-fed on G. gallus had significantly higher DNA concentration than those blood-fed on Columba sp. (p-value <0.001) and M musculus (p-value <0.001). The 215-base-pair 12S rRNA fragment was amplified from all samples and produced reliable sequences, enabling the identification of the bloodmeal source, most of which showed identity and coverage above 95%. The phenol-chloroform method was much less expensive than the commercial kit but took considerably more time to perform. Conclusions: Our data showed that both DNA extraction methods produced reliable sequences enabling identification of triatomine bloodmeal sources but differed greatly in cost and time required. | en_US |
Afiliación | Universidade Federal do Rio Grande do Norte. Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Natal, RN, Brasil/Universidade Federal de Minas Gerais. Instituto de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Parasitologia. Belo Horizonte, MG, Brasil. | en_US |
Afiliación | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto René Rachou. Belo Horizonte, MG, Brasil. | en_US |
Afiliación | Universidade Federal do Rio Grande do Norte. Centro de Biociências. Programa de Pós-Graduação em Biologia Parasitária. Natal, RN, Brasil. | en_US |
Afiliación | Universidade Federal do Rio Grande do Norte. Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Ciências Aplicadas à Saúde da Mulher. Natal, RN, Brasil. | en_US |
Afiliación | Universidade Federal do Rio Grande do Norte. Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas.Natal, RN, Brasil/Universidade Federal do Rio Grande do Norte. Centro de Biociências. Programa de Pós-Graduação em Biologia Parasitária. Natal, RN, Brasil. | en_US |
Afiliación | Universidade Federal do Rio Grande do Norte. Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Natal, RN, Brasil/Universidade Federal de Minas Gerais. Instituto de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Parasitologia. Belo Horizonte, MG, Brasil. | en_US |
Afiliación | Universidade Federal de Minas Gerais. Instituto de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Parasitologia. Belo Horizonte, MG, Brasil. | en_US |
Palavras clave en Inglês | Triatominae | en_US |
Palavras clave en Inglês | Gastrointestinal contents | en_US |
Palavras clave en Inglês | RNA ribosomal 12S | en_US |
Palavras clave en Inglês | Polymerase Chain Reaction | en_US |