Advisor | Castilho, Leda dos Reis | |
Advisor | Ferraz, Helen Conceição | |
Author | Ribeiro, Daniel André | |
Access date | 2023-10-10T17:32:30Z | |
Available date | 2023-10-10T17:32:30Z | |
Document date | 2009 | |
Citation | RIBEIRO, D. A. Co-expressão dos genes do fator IX e das enzimas γcarboxilase, VKORC1 e PACE em células CHO. 2009. 138 f. Dissertação (Mestrado em Engenharia Química) - Universidade Federal do Rio de Janeiro, Rio de Janeiro, 2009. | en_US |
URI | https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/60762 | |
Abstract in Portuguese | Neste trabalho o gene do fator IX, proteína utilizada no tratamento da hemofilia B, foi co-expresso com os genes das enzimas γ-carboxilase, VKORC1 e PACE, responsáveis pelas modificações pós-tradução da molécula do fator IX, em células CHO. Estas modificações são imprescindíveis para a atividade biológica do fator IX. Foram construídos vetores bicistrônicos com o elemento IRES defectivo intermediando os dois genes, com os cDNAs do fator IX e das enzimas. A expressão gênica, a produção do fator IX total e a atividade do fator IX foram avaliadas em células CHO transfectadas com o vetor pIRES, de integração aleatória, e com o vetor pcDNA5/FRT, de integração sítio-dirigida. O nível de expressão e produção de fator IX em células transfectadas com o vetor pIRES foi baixo em relação ao obtido para o pcDNA5/FRT. Isto comprovou a superioridade do sistema de integração sítio-dirigida em relação à integração aleatória. Como a expressão utilizando o vetor pIRES foi baixa, praticamente não houve influência da co-expressão das enzimas. Já com o pCDNA5/FRT, a coexpressão da γ-carboxilase prejudicou a produção de fator IX funcional, provavelmente pela reduzida oferta de co-fator desta enzima, a vitamina K reduzida. | en_US |
Language | por | en_US |
Rights | open access | en_US |
Subject in Portuguese | Enzimas γ-carboxilase, VKORC1 e PACE | en_US |
Subject in Portuguese | Produção fator IX | en_US |
Subject in Portuguese | Células CHO | en_US |
Subject in Portuguese | Sistema de integração sítio-dirigida FRT | en_US |
Title | Co-expressão dos genes do fator IX e das enzimas PACE, gama-carboxilase e VKORC1 em células CHO | en_US |
Type | Dissertation | en_US |
Defense date | 2009 | |
Defense Institution | Universidade Federal do Rio de Janeiro, Corpo Docente do Instituto Alberto Luiz Coimbra de Pós-Graduação e Pesquisa de Engenharia | en_US |
Degree level | Mestrado Acadêmico | en_US |
Place of Defense | Rio de Janeiro, RJ. | en_US |
Program | Programa de Engenharia Química | en_US |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. | en_US |
Member of the board | Alves, Tito Lívio Moitinho | |
Member of the board | Larentis, Ariane Leites | |