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https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/61406
UTILIZAÇÃO DE AGULHA SEMIAUTOMÁTICA PARA COLETA DE AMOSTRAS DE LINFONODO PARA O DIAGNOSTICO DA INFECÇÃO POR LEISHMANIA LEISHMANIA INFANTUM EM CÃES
Diagnóstico
Cultura Parasitológica
Agulha Semiautomática
Cães
Mendes Junior, Artur Augusto Velho | Date Issued:
2020
Advisor
Affilliation
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Infectologia Evandro Chagas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Abstract in Portuguese
A Leishmaniose Visceral Americana (LVA) é considerada uma das principais parasitoses reemergentes no Brasil e no mundo e um importante desafio para a Saúde Pública. Possui como agente etiológico o protozoário Leishmania infantum e tem como seu principal vetor Lutzomyia longipalpis. O presente estudo tem como objetivo geral é avaliar a utilização da agulha semiautomática para coleta de amostras de linfonodo para o diagnóstico da infecção por l. infantum em cães utilizando amostras de linfonodo poplíteo coletadas através de punção por agulha semiautomática (PASA), punção por agulha fina (PAAF) e necropsia de linfonodo (NL). A coleta dos espécimes clínicos foi realizada em 30 cães soropositivos provenientes do município de Barra Mansa (RJ). O cão atendido, após passar por exame clínico, era submetido à sedação e em seguida a eutanásia. Posteriormente, foi realizada a coleta de amostras em um mesmo linfonodo poplíteo usando PASA, PAAF e NL. As amostras retiradas por essas técnicas foram armazenadas separadamente em tubos contendo solução salina estéril, para realização de cultura parasitológica (CP). Outro fragmento do mesmo linfonodo poplíteo coletado por NL foi armazenado em um frasco contendo formalina tamponada neutra a 10%, para realização de imuno-histoquímica (IHQ) e histopatologia por coloração hematoxilina-eosina (H.E). Nos 30 animais estudados, 26 (86%) apresentavam sinais clínicos compatíveis com Leishmaniose Visceral Canina. Os sinais clínicos que apresentaram as maiores frequências foram: esplenomegalia (76%), alterações dermatológicas (60%), linfadenomegalia (40%), hepatomegalia (36%), onicogrifose (30%). Vinte e nove cães (97%) foram positivos para Leishmania sp. no linfonodo em pelo menos uma das técnicas de diagnóstico utilizadas. As frequências de positividade para Leishmania spp. em amostras de linfonodo poplíteo pela técnica de diagnostico em função do número de amostras coletadas para cada técnica, utilizada foram: 64 (71%) cultura parasitológica (CP), 21 (70%) imunohistoquimica (IHQ), e 10 (33,3%) hematoxilina-eosina (H.E). Os resultados em relação à frequência de positividade para Leishmania sp. por CP utilizando diferentes técnicas de coleta de amostra de linfonodo poplíteo nos animais estudados foram: 23 (77%) na NL, 22 (73%) na PAAF e 19 (63%) na PASA. A contaminação microbiológica na CP foi detectada em apenas 4 (4,4%) amostras das 90 analisadas e em apenas 8 (12,5%) amostras coletadas de um total de 64 amostras positivas o resultado não foi obtido na primeira leitura, excluído as amostras negativas e as amostras que registraram contaminação microbiológica. A técnica de coleta por PASA em linfonodo políteo combinada a cultura parasitológica se mostrou uma ferramentea útil para o diagnóstico de L. infantum em cães, com os resultados obtidos neste estudo podemos considerar o linfonodo (poplíteo) como um excelente tecido de escolha para o diagnóstico de L. infantum
Abstract
American Visceral Leishmaniasis (AVL) is considered one of the main re-emerging parasitosis in Brazil and the world and an important public health challenge. It has as its etiological agent the protozoan Leishmania infantum and has as its main vector Lutzomyia longipalpis. The general objective of this study is to evaluate the use of the semiautomatic needle to collect lymph node samples for the diagnosis of L. infantum infection in dogs using popliteal lymph node samples collected through semiautomatic needle puncture (PASA), fine needle puncture (PAAF) and lymph node necropsy (NL). The clinical specimens were collected from 30 seropositive dogs from the municipality of Barra Mansa (RJ). The attended dog, after passing for clinical examination, was submitted to sedation and then to euthanasia. Later, samples were collected in the same popliteal lymph node using PASA, PAAF and NL. The samples taken by these techniques were stored separately in tubes containing sterile saline solution for parasitological culture (PC). Another fragment of the same popliteal lymph node collected by NL was stored in a flask containing 10% neutral buffered formalin for immunohistochemistry (IHQ) and histopathology by hematoxylin-eosin staining (H.E.). In the 30 animals studied, 26 (86%) presented clinical signs compatible with Canine Visceral Leishmaniasis. The clinical signs that presented the highest frequencies were: splenomegaly (76%), dermatological changes (60%), lymphadenomegaly (40%), hepatomegaly (36%), onychogyphosis (30%). Twenty-nine dogs (97%) were positive for Leishmania sp. in lymph node in at least one of the diagnostic techniques used. The frequencies of positivity for Leishmania spp. in popliteal lymph node samples by the diagnostic technique as a function of the number of samples collected for each technique used were: 64 (71%) parasitological culture (PC), 21 (70%) immunohistochemistry (IHQ), and 10 (33.3%) hematoxylin-eosin (H.E). The results regarding the frequency of positivity for Leishmania sp. per PC using different techniques of popliteal lymph node sampling in the animals studied were: 23 (77%) in NL, 22 (73%) in PAAF and 19 (63%) in PASA. Microbiological contamination in the PC was detected in only 4 (4.4%) samples of the 90 analyzed and in only 8 (12.5%) samples collected from a total of 64 positive samples the result was not obtained in the first reading, excluding negative samples and samples that recorded microbiological contamination. The technique of PASA collection in polite lymph node combined with parasitological culture proved to be a useful tool for the diagnosis of L. infantum in dogs, with the results obtained in this study we can consider the lymph node (popliteum) as an excellent tissue of choice for the diagnosis of L. infantum
Keywords in Portuguese
Leishmania InfantumDiagnóstico
Cultura Parasitológica
Agulha Semiautomática
Cães
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