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https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/7208
SINGLE-STEP DUPLEX KDNA-PCR FOR DETECTION OF LEISHMANIA DONOVANI COMPLEX IN HUMAN PERIPHERAL BLOOD SAMPLES.
Author
Affilliation
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Rene Rachou. Laboratorio de Pesquisas Clınicas. Belo Horizonte-MG, Brazil
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Rene Rachou. Laboratorio de Pesquisas Clınicas. Belo Horizonte-MG, Brazil
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Rene Rachou. Laboratorio de Pesquisas Clınicas. Belo Horizonte-MG, Brazil
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Rene Rachou. Laboratorio de Pesquisas Clınicas. Belo Horizonte-MG, Brazil
Universidade Federal de Minas Gerais. Faculdade de Medicina. Departamento de Clınica Medica. Belo Horizonte, MG, Brazil
Faculdade de Medicina Universidade de Sao Paulo. Instituto de Psiquiatria. Laboratorio de Neurociencias. Sao Paulo, SP, Brazil
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Rene Rachou. Laboratorio de Pesquisas Clınicas. Belo Horizonte-MG, Brazil
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Rene Rachou. Laboratorio de Pesquisas Clınicas. Belo Horizonte-MG, Brazil
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Rene Rachou. Laboratorio de Pesquisas Clınicas. Belo Horizonte-MG, Brazil
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Rene Rachou. Laboratorio de Pesquisas Clınicas. Belo Horizonte-MG, Brazil
Universidade Federal de Minas Gerais. Faculdade de Medicina. Departamento de Clınica Medica. Belo Horizonte, MG, Brazil
Faculdade de Medicina Universidade de Sao Paulo. Instituto de Psiquiatria. Laboratorio de Neurociencias. Sao Paulo, SP, Brazil
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Rene Rachou. Laboratorio de Pesquisas Clınicas. Belo Horizonte-MG, Brazil
Abstract
A duplex polymerase chain reaction (PCR) assay was performed using a sense Leishmania genus-specific oligonucleotides to amplify the conserved region of 120 bp of minicircle kDNA and an additional antisense Leishmania donovani oligonucleotide that amplifies a complex-specific fragment of 90 bp. All 12 tested reference isolates of the L. donovani complex yielded a complex-specific amplification product of 90 bp concurrently with a genus-specific 120-bp product. All 17 tested reference isolates pertaining to other complexes presented only the genus-specific 120-bp product. Peripheral blood samples of twenty patients with visceral leishmaniasis positive by the genus-specific PCR presented both fragments with the duplex assay. This duplex PCR can be applied as a 1-step diagnostic tool where discrimination of L. donovani complex species is relevant for clinical and epidemiologic purposes.
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