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LEISHMANIA ENRIETTII: BIOCHEMICAL CHARACTERISATION OF LIPOPHOSPHOGLYCANS (LPGS) AND GLYCOINOSITOLPHOSPHOLIPIDS (GIPLS) AND INFECTIVITY TO CAVIA PORCELLUS.
Autor
Paranaíba, Larissa Ferreira
Assis, Rafael Ramiro de
Nogueira, Paula Monalisa
Torrecilhas, Ana Claúdia
Campos, João Henrique
Silveira, Amanda Cardoso de Oliveira
Martins Filho, Olindo Assis
Pessoa, Natalia Lima
Campos, Marco Antônio
Parreiras, Patrícia Martins
Melo, Maria Norma
Gontijo, Nelder de Figueiredo
Soares, Rodrigo Pedro Pinto
Assis, Rafael Ramiro de
Nogueira, Paula Monalisa
Torrecilhas, Ana Claúdia
Campos, João Henrique
Silveira, Amanda Cardoso de Oliveira
Martins Filho, Olindo Assis
Pessoa, Natalia Lima
Campos, Marco Antônio
Parreiras, Patrícia Martins
Melo, Maria Norma
Gontijo, Nelder de Figueiredo
Soares, Rodrigo Pedro Pinto
Afiliación
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Belo Horizonte, MG, Brasil/Universidade Federal de Minas Gerais. Instituto de Ciências Biológicas. Departamento de Parasitologia. Laboratório de Fisiologia de Insetos Hematófagos. Belo Horizonte, MG, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Belo Horizonte, MG, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Laboratorio de Parasitologia Celular e Molecular. Belo Horizonte, MG, Brasil.
Universidade Federal de São Paulo. Departamento de Ciências Biológicas. Laboratório de Imunologia Celular e Bioquímica de Fungos e Protozoários. São Paulo, SP, Brasil.
Universidade Federal de São Paulo. Departamento de Ciências Biológicas. Laboratório de Imunologia Celular e Bioquímica de Fungos e Protozoários. São Paulo, SP, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Belo Horizonte, MG, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Belo Horizonte, MG, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Belo Horizonte, MG, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Belo Horizonte, MG, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Belo Horizonte, MG, Brasil.
Universidade Federal de Minas Gerais. Instituto de Ciências Biológicas. Departamento de Parasitologia. Laboratório de Biologia de Leishmania. Belo Horizonte, MG, Brasil.
Universidade Federal de Minas Gerais. Instituto de Ciências Biológicas. Departamento de Parasitologia. Laboratório de Fisiologia de Insetos Hematófagos. Belo Horizonte, MG, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Laboratorio de Parasitologia Celular e Molecular. Belo Horizonte, MG, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Belo Horizonte, MG, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Laboratorio de Parasitologia Celular e Molecular. Belo Horizonte, MG, Brasil.
Universidade Federal de São Paulo. Departamento de Ciências Biológicas. Laboratório de Imunologia Celular e Bioquímica de Fungos e Protozoários. São Paulo, SP, Brasil.
Universidade Federal de São Paulo. Departamento de Ciências Biológicas. Laboratório de Imunologia Celular e Bioquímica de Fungos e Protozoários. São Paulo, SP, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Belo Horizonte, MG, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Belo Horizonte, MG, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Belo Horizonte, MG, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Belo Horizonte, MG, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Belo Horizonte, MG, Brasil.
Universidade Federal de Minas Gerais. Instituto de Ciências Biológicas. Departamento de Parasitologia. Laboratório de Biologia de Leishmania. Belo Horizonte, MG, Brasil.
Universidade Federal de Minas Gerais. Instituto de Ciências Biológicas. Departamento de Parasitologia. Laboratório de Fisiologia de Insetos Hematófagos. Belo Horizonte, MG, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Laboratorio de Parasitologia Celular e Molecular. Belo Horizonte, MG, Brasil.
Resumen en ingles
BACKGROUND: Leishmania enriettii is a species non-infectious to man, whose reservoir is the guinea pig Cavia porcellus. Many aspects of the parasite-host interaction in this model are unknown, especially those involving parasite surface molecules. While lipophosphoglycans (LPGs) and glycoinositolphospholipids (GIPLs) of Leishmania species from the Old and New World have already been described, glycoconjugates of L. enriettii and their importance are still unknown.
METHODS: Mice peritoneal macrophages from C57BL/6 and knock-out (TLR2 -/-, TLR4 -/-) were primed with IFN-γ and stimulated with purified LPG and GIPLs from both species. Nitric oxide and cytokine production were performed. MAPKs (p38 and JNK) and NF-kB activation were evaluated in J774.1 macrophages and CHO cells, respectively.
RESULTS: LPGs were extracted, purified and analysed by western-blot, showing that LPG from L88 strain was longer than that of Cobaia strain. LPGs and GIPLs were depolymerised and their sugar content was determined. LPGs from both strains did not present side chains, having the common disaccharide Gal(β1,4)Man(α1)-PO4. The GIPL from L88 strain presented galactose in its structure, suggestive of type II GIPL. On the other hand, the GIPL of Cobaia strain presented an abundance of glucose, a characteristic not previously observed. Mice peritoneal macrophages from C57BL/6 and knock-outs (TLR2 -/- and TLR4 -/-) were primed with IFN-γ and stimulated with glycoconjugates and live parasites. No activation of NO or cytokines was observed with live parasites. On the other hand, LPGs and GIPLs were able to activate the production of NO, IL-6, IL-12 and TNF-α preferably via TRL2. However, in CHO cells, only GIPLs were able to activate TRL2 and TRL4. In vivo studies using male guinea pigs (Cavia porcellus) showed that only strain L88 was able to develop more severe ulcerated lesions especially in the presence of salivary gland extract (SGE).
CONCLUSION: The two L. enriettii strains exhibited polymorphisms in their LPGs and GIPLs and those features may be related to a more pro-inflammatory profile in the L88 strain.
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