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https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/14343
Type
DissertationCopyright
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2017-08-18
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AVALIAÇÃO DA α-GLICOSIDASE CQM1 DE CULEX QUINQUEFASCIATUS E O IMPACTO DE SUAS MUTAÇÕES NA FISIOLOGIA DE LARVAS
Culex/genética
Receptores de superfície celular/metabolismo
Resistência a inseticidas/genética
Bacillus/patogenicidade
Toxinas Bacterianas
Alfa-glucosidases
Mutação/genética
Nascimento, Nathaly Alexandre do | Date Issued:
2016
Alternative title
Evaluation of α-glucosidase Cqm1 from Culex quinquefasciatus and the impact of its mutations on larvae physiologyComittee Member
Affilliation
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães. Recife, PE, Brasil.
Abstract in Portuguese
Lysinibacillus sphaericus (Lsp) é uma bactéria entomopatógena que produz a toxina Bináriav(Bin) com atividade larvicida para culicídeos. A sua ação em Culex quinquefasciatus depende da ligação da toxina Bin à α-glicosidase (Aglu) Cqm1, que atua como receptor no epitélio intestinal de larvas. Na colônia R2362, foram caracterizados dois alelos de resistência ao Lsp: cqm1REC e cqm1REC-2, cujas mutações impedem a expressão da Aglu Cqm1. O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade catalítica da Cqm1 e comparar a atividade α-glicosidase e o
desenvolvimento pré-imaginal de larvas de indivíduos susceptíveis (S) e resistentes (R) para cada alelo. Para isto, foram avaliados os seguintes parâmetros: atividade catalítica da Cqm1
recombinante; padrão de transcrição de outras Aglus parálogas à Cqm1; atividade de Aglus nativas em larvas; sobrevivência de indivíduos frente a diferentes dietas. A Aglu Cqm1 mostrou atividade enzimática ótima à 37o C, pH 7,5-8,0 e utilizando o substrato sintético pNαG. A atividade α-glicosidase total em larvas S e R foi similar, apesar da ausência de expressão da Cqm1 nas larvas R. A investigação in silico revelou 18 proteínas parálogas à Cqm1 e, dentre 11 investigadas, nove são expressas em larvas S e R. A análise quantitativa de três parálogas demonstrou que duas tem um padrão de transcrição mais elevado em larvas resistentes, sugerindo a existência de um mecanismo de compensação de expressão de α-glicosidases. O desenvolvimento pré-imaginal de larvas S foi decrescente nas seguintes dietas: ração de gatos, ração de peixes, leite desnatado, extrato de levedura e sacarose. De uma forma global, a taxa de sobrevivência de larvas R foi inferior à S em todas as dietas testadas. Os dados obtidos mostram que as mutações ligadas aos alelos cqm1REC e cqm1REC-2 não parecem impactar a atividade Aglu nas larvas e que o custo biológico observado poderia estar relacionado a outros genes e vias metabólicas.
DeCS
Culex/efeitos de drogasCulex/genética
Receptores de superfície celular/metabolismo
Resistência a inseticidas/genética
Bacillus/patogenicidade
Toxinas Bacterianas
Alfa-glucosidases
Mutação/genética
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