Advisor | Melo Neto, Osvaldo Pompílio | pt_BR |
Author | Silva, João Ramos da Cruz | pt_BR |
Access date | 2016-05-19T13:08:21Z | |
Available date | 2016-05-19T13:08:21Z | |
Document date | 2014 | |
Citation | SILVA, João Ramos da Cruz. Análise da expressão heteróloga de protéinas com domínios de ligação a RNA em Leishmania infantum. 2014. 73 f. Dissertação (Mestrado Acadêmico em Biociências e Biotecnologia em Saúde) - Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães, Recife, Fundação Oswaldo Cruz, 2014. | pt_BR |
URI | https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/14347 | |
Abstract in Portuguese | Os tripanossomatídeos possuem uma combinação não usual de mecanismos moleculares, e seus processos de regulação de expressão gênica ocorreram a nível pós-transcricional. Acredita-se que essa regulação envolva tanto o controle da estabilidade dos mRNAs, como sua tradução em proteínas, eventos em que atua a proteína de ligação à cauda poli-A (PABP - Poly-A Binding Protein), uma das principais proteínas de ligação a RNAs em eucariotos. Um grande número destas proteínas está presente nos tripanosomatídeos, se caracterizando por possuírem domínios típicos de ligação a RNA, como o domínio RRM (RNA Recognition Motif). Dentre estas se destacam as proteínas de ligação a sequências ricas em uridina (UBPs), que se mostraram capazes de interagir com homólogos de PABP. Outras proteínas hipotéticas contendo domínios de ligação a RNA foram identificadas em ensaios que buscavam parceiros diferenciais para os três homólogos de PABP de Leishmania. Este trabalho se propôs a contribuir na caracterização funcional das proteínas UBPs e das proteínas hipotéticas, através da otimização de sua expressão de forma heteróloga em L. infantum, fusionadas ao epítopo HA. Para isto, os genes codificantes dos três homólogos de UBPs, e de cinco outras proteínas de ligação a RNA que parecem interagir com PABPs, foram amplificados e clonados em vetor de expressão de Leishmania. As construções geradas foram transfectadas em L. infantum e a expressão de seis destas proteínas avaliada. Os resultados obtidos mostram uma variação no reconhecimento das proteínas geradas com anticorpos comerciais anti-HA, que parecem depender da sequência de aminoácidos da sua extremidade C-terminal. Diferenças significativas nos seus níveis de expressão também foram observadas. Entre os três homólogos de UBP, dois destes se mostraram mais abundantes enquanto que os três são representados por mais de uma banda, indicando possíveis modificações pós-traducionais | pt_BR |
Language | por | pt_BR |
Publisher | Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães | pt_BR |
Rights | open access | pt_BR |
Subject in Portuguese | Regulação da Expressão Gênica
Proteína de Ligação à Cauda poli-A
Proteínas de Ligação a RNA
RRM | pt_BR |
Title | Análise da expressão heteróloga de protéinas com domínios de ligação a RNA em Leishmania infantum | pt_BR |
Alternative title | Expression analysis of heterologous proteins with RNA-binding domains in Leishmania infantum | en |
Type | Dissertation | en |
Defense date | 2014-07-31 | pt_BR |
Defense Institution | Fundação Oswaldo Cruz.Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães. | pt_BR |
Degree level | Mestrado Acadêmico | pt_BR |
Place of Defense | Recife/PE | pt_BR |
Program | Programa de Pós-Graduação de Biociências e Biotecnologia em Saúde | pt_BR |
Co-Advisor | Lima, Tamara De'Carli da Costa | pt_BR |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães. Recife, PE, Brasil | pt_BR |
Member of the board | Melo Neto, Osvaldo Pompílio de | pt_BR |
Member of the board | Silva, Norma Lucena Cavalcanti Licínio da | pt_BR |
Member of the board | Melo, Tatiany Patrícia Romão Pompílio de | pt_BR |
DeCS | Regulação da Expressão Gênica | pt_BR |
DeCS | Proteínas de Ligação a RNA | pt_BR |
DeCS | Leishmania infantum | pt_BR |
DeCS | Transdução de Sinal | pt_BR |