Caracterização da resposta imune induzida por proto colos de vacinação dose e reforço usando diferentes vetores virais (Adenovírus e MVA) expressando o gene A2 de Leishmania donovani

Abstract

As Leishmanioses são consideradas pela Organização Mundial de Saúde como uma das seis doenças tropicais mais importantes. A ausência de uma forma eficaz de controle e contenção da doença justifica o desenvolvimen to de uma vacina mais eficaz. Por sua vez, o antígeno A2, exclusivamente expresso nas f ormas amastigotas de Leishmania tem sido considerado um excelente alvo no desenvolviment o de formulações vacinais em fase experimental. Esse trabalho v isou à caracterização da resposta imune induzida por diferentes protocolos de vaci nação dose e reforço usando, além do MVA-A2, o Adenovírus-A2, AdA2. O MVA é um ví rus atenuado, derivado do Vírus Vaccínia Ankara, não replicativo em células de mamíf eros. Assim, foram avaliadas as respostas celular, por ensaios de ELISPOT e citotoxicidade in vivo , mediante estimulação dos esplenócitos com peptídeos correspon dentes aos epítopos para células TCD4 + e TCD8 + na proteína A2 e a resposta humoral, por ELISA. Ape nas os animais vacinados com AdA2 + MVAA2 apresentaram nívei s elevados de células produtoras de IFN γ e níveis de baixos IL-10 e IL-4, sob estimulação com am bos os peptídeos, nos ensaios de ELISPOT. Da mesma forma, alta porcentagem de lise foi observada apenas nesse grupo de animais, indicando que e sse esquema vacinal foi capaz de induzir a resposta de células T CD8 + e TCD4 + . A resposta imune induzida nesse grupo, considerada do tipo Th1, tem sido relacionad a à proteção contra a infecção desafio por diferentes espécies de Leishmania. Nos testes de ELISA, não foi identificada produção de anticorpos contra o Antígeno S olúvel de Leishmania, SLA, da forma promastigota, em quaisquer grupos vacinais, o que os diferenciou dos animais infectados, nos quais a produção foi observada. Isso é i mportante no diagnóstico dos cães domésticos, uma vez que a vacina atual não possibilita essa diferenciação. Nos outros grupos vacinados, a resposta imune celular será inv estigada contra a forma íntegra da proteína A2 e SLA da forma amastigota