Enzymatic and structural characterization of a basic phospholipase A(2) from the sea anemone Condylactis gigantea

Universidad de La Habana. Facultad de Biologia. Centro de Estudios de Proteínas. Havana, Cuba.
Universidade de São Paulo. Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto. Departamento de Análises Clínicas, Toxicológicas e Bromatológicas. Ribeirão Preto, SP, Brasil./ Universidade Federal de Lavras. Departamento de Química. Lavras, MG, Brasil
Universidade de São Paulo. Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto. Departamento de Análises Clínicas, Toxicológicas e Bromatológicas. Ribeirão Preto, SP, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Bioquímica de Proteínas e Peptídeos. Rio de Janeiro, RJ. Brasil.
Universidade Federal Fluminense. Instituto de Biologia. Departamento de Biologia Celular e Molecular. Niterói, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Fiocruz Noroeste. Porto |Velho, RO, Brasil / Universidade Federal de Rondonia, UNIR, RO, Brasil.
Universidade Federal de São João Del Rei. Divinópolis,MG, Brasil.
Universidad de La Habana. Facultad de Biologia. Centro de Estudios de Proteínas. Havana, Cuba.
Universidad de La Habana. Facultad de Biologia. Centro de Estudios de Proteínas. Havana, Cuba.
Universidade de São Paulo. Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto. Departamento de Análises Clínicas, Toxicológicas e Bromatológicas. Ribeirão Preto, SP, Brasil.

Abstract

This work aimed at the isolation and structural/functional characterization of a phospholipase A(2) (CgPLA(2)) from the extract of the anemone Condylactis gigantea. CgPLA(2) was isolated with a high purity level through three chromatographic steps, showing pI 8.6 and molecular weights of 14,500 and 29,000 for the monomer and dimer, respectively. CgPLA(2) showed a high catalytic activity upon fluorescent phospholipids inducing no direct hemolytic activity. This enzyme, which is Ca(2+)-dependent, showed a lower stability against temperature and pH variations when compared with snake venom enzymes. The enzymatic activity was significantly reduced or completely abolished after chemical modification of CgPLA(2) with BPB. Its cDNA was then obtained, with 357 base pairs which codified for a mature protein of 119 amino acid residues. A comparative analysis of the primary structure of CgPLA(2) revealed 84%, 61%, 43% and 42% similarity to the PLA(2)s from Adamsia carciniopados, Nematostella vectensis, Vipera russelli russelli and Bothrops jararacussu, respectively.

Keywords in Portuguese

Anêmonas de mar
Análise filogenética
Estrutura primária
Caracterização funcional
Fosfolipases A2
Modelagem molecular

Keywords

Sea anemones
Condylactis gigantea
Phospholipase A2
Primary structure
Functional characterization
Molecular modeling
Phylogenetic analysis

Publisher

Elsevier

Citation

ROMERO, Lazara; et al. .Enzymatic and structural characterization of a basic phospholipase A2 from the sea anemone Condylactis gigantea. Biochimie, v.92, n.8, p.1063-1071, 2010.

DOI

10.1016/j.biochi.2010.05.007

ISSN

0300-9084

Please use this identifier to cite or link to this item: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/21061

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Embargo date

2030-01-01

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