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https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/34884
CARACTERIZAÇÃO CLONAL DA CEPA COLOMBIANA DO TRYPANOSOMA CRUZI: ESTUDO DO COMPORTAMENTO BIOLÓGICO, BIOQUÍMICO E DA RESPOSTA TERAPÊUTICA DOS CLONES ISOLADOS
Camandaroba, Edson Luiz Paes | Date Issued:
1999
Author
Advisor
Affilliation
Universidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina. Salvador, BA, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil.
Abstract in Portuguese
Caracterização clonal da cepa Colombiana do T.cruzi: estudo do comportamento biológico, bioquímico e da resposta terapêutica dos clones isolados. A cepa Colombiana do T. cruzi, protótipo do biodema 111 e do zimodema 1, apresenta caracteres bem definidos quanto à sua patogenicidade e tropismo tissular. Foi investigada a estrutura clonal dessa cepa, com o objetivo de caracterizar as suas populações e investigar a relação entre a resposta aos quimioterápicos e as características dos seus clones. Foram isolados sete clones. Oito grupos de camundongos albinos Swiss foram infectados com a cepa parental e seus clones, com inóculos que variaram entre 5 x a 1 x 10^, e analisados os caracteres biológicos (índices parasitêmicos, mortalidade, morfologia das formas sangüicolas) e isoenzimáticos (PGM, GPI, ASAT, ALAT), e realizado o estudo histopatólogico para investigação do tropismo tissular e da patogenicidade. Resposta à quimioterapia: Oito grupos de camundongos infectados com a cepa parental e com os clones foram tratados com o Benzonidazol durante 90 dias, a partir do 20- dia de infecção. Os animais tratados, foram submetidos aos testes de cura parasitológicos, ao teste sorológico e ao teste molecular realizado pelo PCR do sangue periférico. Os resultados mostraram que, tanto a cepa Colombiana parental, como os sete clones, apresentam as características básicas das cepas do Tipo 111 e perfil isoenzimático do Zimodema 1, embora com variações no número de bandas em ALAT e ASAT. A cepa parental mostrou virulência elevada, com índice de mortalidade alto até 30 dias (100%), também obsen^/ado em quatro dos clones, com índices de 78 a 100%. Em três clones a mortalidade foi baixa (7% a 23%). As lesões histopatológicas foram características das cepas de Tipo III, com predominância de parasitismo de músculo esquelético e, em menor grau, do miocárdio , com lesões necrótico- inflamatórias extensas, entre 20 e 30 dias de infecção. Os resultados da quimioterapia mostraram alta resistência da cepa e dos clones, ao tratamento com o Benzonidazol. Em conclusão, a estrutura clonal da cepa Colombiana, na amostragem estudada, é homogênea, com variações de virulência, mantendo os perfis parasitêmicos, o padrão Z1 do zimodema, alta patogenicidade e resistência ao tratamento quimioterápico.
Abstract
The Colombian strain of T. cruzi, protype of biodeme III and zymodeme 1, presents well defined characters with reference to its pathogenicity and tissue tropism. The clonal structure of this strain was studied in order to characterize its populations and to investigate the relationship between chemotherapeutic response and its clonal characteristics. Seven clones were isolated. Eight groups of Swiss mice were infected with parental strain and clones, respectively with inocula from 5x10"^ to 1x10® blood forms; their biological (parasitémie rates, mortality, morphology of blood forms) and isoenzymic (PGM, GPI, ASAT, ALAT) characters were analysed; histopathological study was performed in order to investigate tissue tropism and pathology. Response to the chemotherapy: eight groups of mice, infected with parental strain and clones, were treated with Benznidazole during 90 days, from the 20*^ day of infection. Treated animals were submitted to parasitological tests of cure and to serologic test. Examination of peripheral blood by the PCR (Polymerase chain reaction) method was performed as cura test, to detect parasite positive cases post treatment. Results indicated that, both the parental Colombian strain and the seven clones, exhibit the Type 111 strain basic characteristics and zymodeme 1 isoenzymic profile, although presenting variations in ALAT and ASAT bands quantities. The Parental strain presented elevated virulence, with high mortality rate until 30 days (100%), that was also observed in four of the studied clones, with percentages ranging from 78 to 100%. Mortality was low (7% to 23%) in the other three clones. Histopathological lesions were characteristics of Type III strains, with predominance of skeletal muscle parasitism and, to a minor degree, in myocardium, exhibiting necrotic-inflammatory extensive lesions from 20'*^ to 30**^ day of infection. Chemotherapie results have shown strain and clonal resistence to Benznidazole treatment. In conclusion, clonal structure of Colombian strain is homogeneous, although presenting virulence variations but maintaining zymodeme profiles, high pathogenicity and resistance to treatment.
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