Please use this identifier to cite or link to this item: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/35514
Title: Imunoregulação e resposta imune sistêmica e tecidual na leishmaniose mucosa
Advisor: Jesus, Amélia Ribeiro de
Members of the board: Silva, João Santana
Brodskyn, Claudia Ida
Santos, Washington Luis Conrado dos
Barral, Aldina Maria Prado
Jesus, Amélia Maria Ribeiro de
Authors: Carvalho, Lucas Pedreira de
Affilliation: Universidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina. Salvador, BA, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil.
Abstract: Na infecção humana por leishmania há uma complexa interação parasito-hospedeiro, levando a uma variedade de formas clínicas. Em áreas de transmissão de L. brasiliensis, cerca de 3% dos pacientes com leishmaniose cutânea desenvolvem a forma mucosa da doença concomitantemente ou após cicatrização da ulcera. Células mononucleares do sangue periférico (CMSP) de pacientes com LM secretam maiores níveis de IFN-y do que as de pacientes com LC quando estimuladas com antígeno solúvel de leishmania (SLA). A presente tese é composta de 4 trabalhos e teve como objetivo principal caracterizar a resposta imune de pacientes com LM e LC em células de sangue periférico e no tecido, e determinar fatores que possam estar envolvidos na resposta inflamatória exacerbada de pacientes com LM. Análise por citometria de fluxo demonstrou que a célula CD4+ é a principal célula produtora de IFN-yem pacientes com LC ou LM. Na tentativa de modular a produção de IFN-y de pacientes com LC ou LM anticorpos contra citocinas (anti-IL-2, anti-IL-12, e anti-IL-15) ou antígenos recombinantes (LACK e KMPll) indutores de IL-IO foram adicionados a culturas de CMSP estimuladas com SLA. A neutralização de IL-12 não teve efeito significativo na produção de IFN-y em CMSP de pacientes com LC ou LM. A adição de anti-IL-2 suprimiu a produção de IFN-yem 73% e 52% em pacientes com LC e LM, respectivamente. A adição de anti-IL-15 suprimiu 56% da produção de IFN-y de pacientes com LC, mas não teve efeito significativo em pacientes com LM. A adição de LACK ou KMPll a culturas de CMSP estimuladas com SLA suprimiu a produção de IFN¬y de pacientes com LC, mas não teve efeito significativo em pacientes com LM. Não houve diferença significante na expressão de moléculas co-estimulatórias entre CMSP de pacientes com LC e LM. A freqüência de células CD4+ expressando marcadores de ativação celular (CD28-, CD62L- e CD69+) foi maior em pacientes com LM quando comparados com pacientes com LC. A análise de biópsias de pacientes com LM e LC demonstrou que pacientes com LM apresentam maior freqüência de células CD4+ expressando IFN-y, maior freqüência de células CD8+ positivas para Granzima A e menor freqüência de células expressando receptor de IL-I0 quando comparados com pacientes com LC. O presente estudo mostrou que pacientes com LM apresentam uma maior freqüência de células CD4+ ativadas maior do que pacientes com LC. Essas células não são propriamente moduladas por antagonistas de citocinas envolvidas em diferenciação e proliferação linfocitária ou por antígenos que induzem IL-I0, contribuindo também para este aspecto uma menor expressão de IL-l0.
Abstract: Leishmania infection lead to a complex host-parasite relationship in humans, causing a large spectrum of clinical forms of disease. In areas o f L braziliensis transmission 3% of patients with cutaneous leishmanisis (CL) develops concomitantly or after healing of cutaneous ulcers mucosal leishmaniasis (ML). Peripheral blood mononuclear cells (PBMC) from ML patients secrete higher levels of IFN-y than cells from CL patients upon stimulation with soluble leishmania antigen (SLA). The present thesis is composed of four manuscripts and had as the major aim, to characterize the systemic and tissue immune response of CL and ML patients and determine factors that can be involved in the exacerbated inflammatory response in ML patients. Flow cytometry analyses showed that CD4+ T cells are the main source of IFN-y in PBMC of CL and ML patients. In attempt to suppress IFN-y in SLA- stimulated PBMC, blocking antibodies to cytokines (anti-IL-2, anti-IL-12, and anti-IL-15) and recombinant antigens (LACK and KMPll) that induce IL-10 were added to SLA- stimuiated cultures. IL-12 neutralization had a week effect on IFN-y suppression in CL and ML. Anti-IL-2 suppressed IFN-y by 73% in CL and 52% in ML. Anti-IL-15 suppressed 56% of IFN-y in CL but had no effect in ML. Addition of LACK or KMPl 1 to SLA- stimulated cultures was able to suppress SLA-stimulated IFN-y production on CL patients, but had week effect on SLA-stimulated IFN-y production from ML patients. There was no difference in the frequency of cells expressing co-stimulatory molecules or apoptosis between PBMC from CL and ML patients. The frequency of CD4-I- cells expressing cell activation markers (CD28-, CD62L- and CD69-f-) were higher in ML patients when compared with CL patients. The biopsy analysis of ML and CL patients documented a higher expression of IFN-g in CD4-)- cells, higher expression of Granzime A on CD8-I- cells and lower expression of IL-10 receptor on ML patient when compared to CL. Overall, the data show that ML patients have more activated CD4+ T cells than CL patients. These cells are less modulated by antibodies against cytokines involved in differentiation and proliferation of lymphocytes or antigens with regulatory properties. ML cells were also poorly down-modulated by IL-10 induced by LACK and KMPl I, a phenomenon that could be explained by the decrease in the expression of IL-10 receptor.
Keywords: Leishmaniasis
Leishmaniasis Cutaneous
Leishmania braziliensis
Immunoregulation
Protozoan
Protozoan Infections
Mucous Membrane
keywords: Leishmaniose
Leishmaniose Cutânea
Leishmania braziliensis
Imunoregulação
Protozoário
Infecções por Protozoários
Membrana Mucosa
Leishmaniose Mucosa
Issue Date: 2005
Publisher: Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz
Citation: CARVALHO, Lucas Pedreira de. Imunoregulação e resposta imune sistêmica e tecidual na leishmaniose mucosa. 2005. 151 f. Tese (Doutorado em Patologia) - Universidade Federal da Bahia; Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz, Fundação Oswaldo Cruz, Salvador, 2005.
Date of defense: 2005
Place of defense: Salvador/BA
Department: Coordenação de Ensino
Defense institution: Universidade Federal da Bahia. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz
Program: Pós-Graduação em Patologia
Copyright: open access
Appears in Collections:BA - IGM - Teses de Doutorado

Files in This Item:
File Description SizeFormat 
Lucas Pedreira de Carvalho Imunoregulação...2005.pdf3.64 MBAdobe PDFView/Open



FacebookTwitterDeliciousLinkedInGoogle BookmarksBibTex Format mendeley Endnote DiggMySpace

Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.