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IN-HOUSE ELISA METHOD TO ANALYZE ANTI-TRYPANOSOMA CRUZI IGG REACTIVITY FOR DIFFERENTIAL DIAGNOSIS AND EVALUATION OF CHAGAS DISEASE MORBIDITY.
Subclasses de IgG
Diagnostico diferencial
Morbidade da doenca de Chagas
Subclasses de IgG
Diagnostico diferencial
Morbidade da doenca de Chagas
Autor
Afiliación
Universidade Federal de Ouro Preto. Nucleo de Pesquisas em Ciencias Biologicas. Ouro Preto, MG, Brasil.
Universidade Federal de Minas Gerais, Belo Horizonte. Departamento de Clinica Medica. Belo Horizonte, MG, Brasil
Universidade Federal de Ouro Preto. Nucleo de Pesquisas em Ciencias Biologicas. Ouro Preto, MG, Brasil
Universidade Federal de Ouro Preto. Nucleo de Pesquisas em Ciencias Biologicas. Ouro Preto, MG, Brasil/Universidade Federal de Ouro Preto. Departamento de Ciencias Biologicas. Ouro Preto, MG, Brasil
Universidade Federal de Ouro Preto. Nucleo de Pesquisas em Ciencias Biologicas, Ouro Preto, MG/Universidade Federal do Vale do Jequitinhonha e Mucuri. Departamento de Farmacia. Diamantina, MG, Brasil
Fundacao Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Rene Rachou. Laboratorio de Biomarcadores de Diagnostico e Monitoracao. Belo Horizonte, MG, Brasil.
Drexel University College of Medicine. Department of Microbiology & Immunology. Doylestown, PA, USA.
Fundacao Oswaldo Cruz. Laboratorio de Doencas Parasitarias. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundacao Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Rene Rachou. Laboratorio de Biomarcadores de Diagnostico e Monitoracao. Belo Horizonte, MG, Brasil.
Universidade Federal de Ouro Preto. Nucleo de Pesquisas em Ciencias Biologicas, Ouro Preto, MG/Universidade Federal de Ouro Preto. Departamento de Analises Clinicas. Ouro Preto, MG, Brasil.
Universidade Federal de Minas Gerais, Belo Horizonte. Departamento de Clinica Medica. Belo Horizonte, MG, Brasil
Universidade Federal de Ouro Preto. Nucleo de Pesquisas em Ciencias Biologicas. Ouro Preto, MG, Brasil
Universidade Federal de Ouro Preto. Nucleo de Pesquisas em Ciencias Biologicas. Ouro Preto, MG, Brasil/Universidade Federal de Ouro Preto. Departamento de Ciencias Biologicas. Ouro Preto, MG, Brasil
Universidade Federal de Ouro Preto. Nucleo de Pesquisas em Ciencias Biologicas, Ouro Preto, MG/Universidade Federal do Vale do Jequitinhonha e Mucuri. Departamento de Farmacia. Diamantina, MG, Brasil
Fundacao Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Rene Rachou. Laboratorio de Biomarcadores de Diagnostico e Monitoracao. Belo Horizonte, MG, Brasil.
Drexel University College of Medicine. Department of Microbiology & Immunology. Doylestown, PA, USA.
Fundacao Oswaldo Cruz. Laboratorio de Doencas Parasitarias. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundacao Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Rene Rachou. Laboratorio de Biomarcadores de Diagnostico e Monitoracao. Belo Horizonte, MG, Brasil.
Universidade Federal de Ouro Preto. Nucleo de Pesquisas em Ciencias Biologicas, Ouro Preto, MG/Universidade Federal de Ouro Preto. Departamento de Analises Clinicas. Ouro Preto, MG, Brasil.
Resumen en portugues
Introdução: O objetivo foi desenvolver um metodo sorologico in-house de alta especificidade e sensibilidade para diagnosticar e monitorar a morbidade da doenca de Chagas. Métodos: Para tal, a reatividade sorologica de IgG e subclasses foi testada em soros de pacientes chagásicos de Berilo, Vale do Jequitinhonha/MG/Brasil. A reatividade sorologica foi tambem avaliada em amostras de pacientes com outras doencas infecto-contagiosas relevantes, incluindo o HIV, virus da hepatite C (VHC), sifilis (SYP), leishmaniose visceral (LV), leishmaniose tegumentar americana (LTA) e controles nao infectados (NI) para verificar o desempenho do metodo. Outras analises foram feitas para avaliar a aplicabilidade desta metodologia no monitoramento da morbidade da doenca de Chagas. Com este proposito os pacientes com doenca de Chagas foram anteriormente classificados em tres grupos: indeterminados (IND), cardiacos (CARD) e digestivos/mistos (DIG/Mis) conforme seu estado clinico. Resultados: A analise da reatividade sorologica de IgG total na diluicao 1:40 mostrou ser uma abordagem importante no diagnostico da doenca de Chagas (100% de sensibilidade e especificidade e ausencia de reacao cruzada com as demais infeccoes). A analise das subclasses de IgG mostrou reacaocruzada principalmente com NI, LV e LTA em todas as diluicoes. O grupo IND apresentou a maior reatividade para IgG3 e o grupo DIG/Mis apresentou nivel mais elevado de IgG se comparados aos grupos IND e CARD. Conclusões: Estes achados demonstram que o método de ELISA in-house apresenta uma promissora aplicabilidade no diagnostico diferencial e na avaliacao da morbidade da doenca de Chagas.
Resumen en ingles
The goal was to develop an in-house serological method with high specificity and sensitivity for diagnosis and monitoring of Chagas disease morbidity. Methods: With this purpose, the reactivities of anti-T. cruzi IgG and subclasses were tested in successive serum dilutions of patients from Berilo municipality, Jequitinhonha Valley, Minas Gerais, Brazil. The performance of the in-house ELISA was also evaluated in samples from other relevant infectious diseases, including HIV, hepatitis C (HCV), syphilis (SYP), visceral leishmaniasis (VL), and American tegumentary leishmaniasis (ATL), and noninfected controls (NI). Further analysis was performed to evaluate the applicability of this in-house methodology for monitoring Chagas disease morbidity into three groups of patients: indeterminate (IND), cardiac (CARD), and digestive/mixed (DIG/Mix), based on their clinical status. Results: The analysis of total IgG reactivity at serum dilution 1:40 was an excellent approach to Chagas disease diagnosis (100% sensitivity and specificity). The analysis of IgG subclasses showed cross-reactivity, mainly with NI, VL, and ATL, at all selected serum dilutions. Based on the data analysis, the IND group displayed higher IgG3 levels and the DIG/Mix group presented higher levels of total IgG as compared with the IND and CARD groups. Conclusions: These findings demonstrated that methodology presents promising applicability in the analysis of anti-T. cruzi IgG reactivity for the differential diagnosis and evaluation of Chagas disease morbidity.
Palabras clave en portugues
In-house ELISASubclasses de IgG
Diagnostico diferencial
Morbidade da doenca de Chagas
Palabras clave en ingles
In-house ELISASubclasses de IgG
Diagnostico diferencial
Morbidade da doenca de Chagas
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