In-house ELISA method to analyze anti-Trypanosoma cruzi IgG reactivity for differential diagnosis and evaluation of Chagas disease morbidity.

Abstract

Introdução: O objetivo foi desenvolver um metodo sorologico in-house de alta especificidade e sensibilidade para diagnosticar e monitorar a morbidade da doenca de Chagas. Métodos: Para tal, a reatividade sorologica de IgG e subclasses foi testada em soros de pacientes chagásicos de Berilo, Vale do Jequitinhonha/MG/Brasil. A reatividade sorologica foi tambem avaliada em amostras de pacientes com outras doencas infecto-contagiosas relevantes, incluindo o HIV, virus da hepatite C (VHC), sifilis (SYP), leishmaniose visceral (LV), leishmaniose tegumentar americana (LTA) e controles nao infectados (NI) para verificar o desempenho do metodo. Outras analises foram feitas para avaliar a aplicabilidade desta metodologia no monitoramento da morbidade da doenca de Chagas. Com este proposito os pacientes com doenca de Chagas foram anteriormente classificados em tres grupos: indeterminados (IND), cardiacos (CARD) e digestivos/mistos (DIG/Mis) conforme seu estado clinico. Resultados: A analise da reatividade sorologica de IgG total na diluicao 1:40 mostrou ser uma abordagem importante no diagnostico da doenca de Chagas (100% de sensibilidade e especificidade e ausencia de reacao cruzada com as demais infeccoes). A analise das subclasses de IgG mostrou reacaocruzada principalmente com NI, LV e LTA em todas as diluicoes. O grupo IND apresentou a maior reatividade para IgG3 e o grupo DIG/Mis apresentou nivel mais elevado de IgG se comparados aos grupos IND e CARD. Conclusões: Estes achados demonstram que o método de ELISA in-house apresenta uma promissora aplicabilidade no diagnostico diferencial e na avaliacao da morbidade da doenca de Chagas.