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PHOSPHORUS-RICH STRUCTURES AND CAPSULAR ARCHITECTURE IN CRYPTOCOCCUS NEOFORMANS
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Abstract in Portuguese
Objetivo: Neste estudo, objetivamos analisar a relação de estruturas ricas em fósforo com a arquitetura de superfície em Cryptococcus neoformans. Métodos: Estruturas ricas em fósforo em C. neoformans foram analisadas combinando microscopia de fluorescência, extração bioquímica, microscopia eletrônica de varredura, microanálise de raios X de sonda eletrônica e reconstrução 3D de células congeladas de alta pressão e substituídas por congelamento por microscopia eletrônica de varredura de feixe de íons focado (FIB-SEM). Resultados e conclusão: Estruturas intracelulares e de superfície enriquecidas com fósforo foram identificadas. Essas moléculas foram necessárias para a montagem da cápsula, conforme demonstrado em experimentos usando incorporação de polissacarídeos por células deficientes em cápsula e mutantes com defeitos na síntese de polifosfato. A demonstração de polifosfatos intracelulares e associados à parede celular em C. neoformans pode levar a estudos futuros envolvendo sua participação em eventos fisiológicos e patogênicos.
Abstract
Aim: In this study, we aimed to analyze the relationship of phosphorus-rich structures with surface architecture in Cryptococcus neoformans. Methods: Phosphorus-rich structures in C. neoformans were analyzed by combining fluorescence microscopy, biochemical extraction, scanning electron microscopy, electron probe x-ray microanalysis and 3D reconstruction of high pressure frozen and freeze substituted cells by focused ion beam-scanning electron microscopy (FIB-SEM). Results & conclusion: Intracellular and surface phosphorus-enriched structures were identified. These molecules were required for capsule assembly, as demonstrated in experiments using polysaccharide incorporation by capsule-deficient cells and mutants with defects in polyphosphate synthesis. The demonstration of intracellular and cell wall-associated polyphosphates in C. neoformans may lead to future studies involving their participation in both physiologic and pathogenic events.
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