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Title: Análise de aspectos fenotípicos e funcionais de células CD8 positivas na infecção in vitro pelo vírus da imunodeficiências humana do tipo 1
Advisor: Castello Branco, Luiz Roberto Ribeiro
Members of the board: Bongertz, Vera
Moraes, Maria do Carmo Leite de
Fernandez, José Carlos Couto
Authors: Souza, Lúcia Renata Meireles de
Affilliation: Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil
Abstract: Células CD8+ participam do controle da infecção pelo HIV-1 através de atividades citolítica e supressora da replicação viral (não-citolítica). Contudo, durante a progressão da infeção, são observadas alterações em sua diferenciação e função. Várias razões para tal são postuladas, incluindo a suscetibilidade do próprio linfócito T CD8+ à infecção pelo HIV-1. Neste estudo, analisamos os efeitos da infecção in vitro pelo HIV-1 sobre o fenótipo de células CD8+. Comparado às culturas não-infectadas, observamos aumento de células CD8+ CD57+ e CD45RO+, bem como daquelas de estágio intermediário, enquanto a expressão de CD28 e o fenótipo naive diminuem, sem que haja aquisição do fenótipo efetor, padrão este mais evidente em culturas infectadas por vírus X4 que R5, e semelhante ao que é encontrado in vivo. A função da população expandida CD8+CD57+ foi avaliada e parece inibir a proliferação celular, e desse modo, a replicação viral. Nosso terceiro estudo objetivou analisar se a infecção produtiva de células CD8+ pelo HIV-1 afetaria resultados de ensaios de supressão viral in vitro. Nestes experimentos, utilizamos citocinas gc que apresentam-se alteradas na infecção pelo HIV-1, como IL-2, IL-7 e IL-15, e paradoxicalmente, IL-2 e IL-15 modulam ambos os papéis exercidos por células CD8+ na infecção: alvos e supressoras de replicação viral. Em parte, isto se explica pela cinética mais lenta do vítus nestas células, tornando-as reservatórios me potencial. Ainda, como células dendríticas (DC) produzem IL-15, avaliamos se esta citocina, endógena ou exógena, afetaria a susceptibilidade e atividade antiviral de células CD8+ frente ao HIV-1 em co-cultura com DC autólogas. De fato, IL-15 parece ser um importante estímulo para a atividade supressora de células CD8+ mesmo neste modelo mais fisiológico de replicação viral, embora também promova a infecção das mesmas células CD8+. Esta infeção após contato com DC autólogas HIV-1-pulsadas pode ser explicada pela co-expressão de CD4 e CXCR4, provavelmente facilitada pela interação CD28/B7, já que células CD8+CD28+ apresentam maiores níveis de expressão destes receptores, bem como de produtividade do HIV-1. Portanto, terapias que utilizem as gc-cytokines IL-2 ou IL-15 devem levar em consideração não só a ativação de reservatórios de células CD4+, mas também de células CD8+.
Abstract: CD8+ T cells contribute to con trol HIV - 1 infection via cytotoxic and non - lytic suppressor activities. However, during progression of disease, it is observed that CD8+ T cells present impairment of differentiation and function. Many reasons for this disturbance in the physiology of CD8+ cells are discussed, including their own susceptibility to HIV - 1 infection. In this study, we analysed the effects of in vitro HIV - 1 infection on phenotype of CD8+ cells. Compared to non - infected cultures, there was an increase of CD57+ and CD45RO+ CD8+ T cells, with diminished expression of the naïve phe notype. On the other hand, the activated/memory as well as the intermediary subset were augmented, without acquisition of the effector phenotype, a pattern similar to that observed in vivo , and more clear ly seen in cultures infected by X4 than R5 virus. We then evaluated in a second study the function of the expanded CD8+CD57+ subset . We found that these cells were able to inhibit cell proliferation and , thus, viral replication. Our third work was aimed to investigate if productive infection of CD8+ T cells may affect the outcome of suppressor assays in vitro . We analysed the effects of  c - cytokines altered during HIV - 1 infection, like IL - 2, IL - 7 and IL - 15 . P aradoxically , IL - 2 and IL - 15 modulated both roles of CD8+ T cells in HIV - 1 infection: targets and suppressors of viral replication. This may in part be explained by the slower kinetics of viral production by CD8+ T cells compared to CD4+ T cells, what may make them potential virus reservoirs. Since virus - stimulated dendritic cells are able to produce IL - 15, which we demonstrated to promote productive HIV - 1 infection of CD8+ T cells as well as their non - cytolytic antiviral function, we also evaluated in a fourth study , the role of endogenous and exogenous IL - 15 on X4 HIV - 1 production in co - cultures with autologous DC. Indeed, IL - 15 seems to be an important stimulus for CD8+ antiviral activity, albeit it promotes productive HIV - 1 infection in DC/CD8+ co - cultures. Infection of CD8+ cells in contact to autolog ous DC could be explained by their co - expression of CD4 and CXCR4, probably supported by CD28/B7 interaction, since in our studies we found that CD8+CD28+ cells presented higher levels of expression of co - receptors and HIV - 1 productivity than CD8+CD28 - cel ls. Thus, therapies using either  c - cytokines IL - 2 or IL - 15 in HIV - 1 infection might consider the activation not only of CD4+ T cells reservoirs, but also of CD8+ T cells
keywords: Supressão Viral
DeCS: Linfócitos T CD8-Positivos
Citocinas
HIV-1
Infecções por HIV
Issue Date: 2003
Citation: SOUZA, Lúcia Renata Meireles de. Análise de aspectos fenotípicos e funcionais de células CD8 positivas na infecção in vitro pelo vírus da imunodeficiências humana do tipo 1. 2003. 232f. Tese (Doutorado em Biologia Celular e Molecular) – Fundação Oswaldo Cruz, Instituto Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, 2003
Date of defense: 2003
Place of defense: Rio de Janeiro/ RJ
Department: Pós-Graduação em Biologia Celular e Molecular
Defense institution: Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz
Program: Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e Molecular
Copyright: open access
Appears in Collections:IOC - PGBCM - Teses de Doutorado

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