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https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/27426
DETECÇÃO MOLECULAR DE PNEUMOCYSTIS JIROVECII E HISTOPLASMA CAPSULATUM EM PACIENTES INFECTADOS POR HIV NO HOSPITAL CENTRAL DE MAPUTO, MOÇAMBIQUE
Coinfecção
Pneumocystis Carinii
Histoplasma
Pneumonia
Insuficiência Respiratória
Vilanculo, Nelson António Munjovo | Date Issued:
2017
Affilliation
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Infectologia Evandro Chagas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Abstract in Portuguese
Apesar dos avanços verificados nas últimas décadas sobre o conhecimento da etiologia, epidemiologia e tratamento da pneumonia, ela ainda continua sendo uma das maiores causas de morbimortalidade a nível mundial. Na África, especialmente onde as condições climáticas e geográficas favoráveis associada a altas taxas de indivíduos imunocomprometidos, favorece o desenvolvimento e disseminação de agentes etiológicos fúngicos causadores destas patologias. Tais fatores predisponentes estão presente em Moçambique e também é verificada a ocorrência de pneumocistose (PCP) e/ou histoplasmose no país. Embora não existam publicações sobre a prevalência destas infecções fúngicas em Moçambique, há descrições da ocorrência de pneumonias causadas por Pneumocystis jirovecci (Pj), bem como co-infecção com outros fungos como Histoplasma capsulatum. Porém, na maioria dos casos de pneumonia se desconhecem os agentes etiológicos específicos, muitas vezes dando se mais ênfase a PCP, por falta de meios de diagnóstico ou estudos que provém o contrário, o que abre um campo para a investigação e identificação de outros agentes como Histoplasma capsulatum (Hc) no país. Por outro lado, o conhecimento do comportamento epidemiológico das doenças no país, e dos agentes etiológicos causadores da pneumonia é fundamental para que seja possível implantar medidas de controle e segurança contra estas patologias oportunistas Neste estudo foram analisadas 50 amostras de lavado bronco-alveolar, de pacientes com suspeita de pneumonias internados ou em observação no Hospital Central de Maputo (HCM), e que foram encaminhadas para o laboratório de Microbiologia da Univeraidsde Eduardo Mondlane, para processamento. Para o diagnóstico foi usado a observação directa com as técnicas de coloração de Gram e Giemsa, coloração pelo método de Grocott e finalmente o nested PCR para identificação dos agentes etiológicos existentes nas amostras de lavado broncoalveolar. Os testes foram feitos em Moçambique e no Brasil, após seguidos todas as questões éticas incluindo a confidencialidade e anonimato. Entre as 50 amostras testadas com a nested PCR, 13 foram negativas, 18 positivas para H. capsulatum, 8 positivas para P. jirovecii, e 11 com coinfecções para ambos agentes etiológicos. Relacionando os resultados moleculares e o sistema de probabilidades, houve uma concordância em 15 indivíduos que apresentavam forte probabilidade de ter PCP (>83%), em aproximadamente 66% (n=10) foram positivos na nested PCR, 2 positivos pela observação directa e 5 deles apresentaram estruturas fúngicas na histopatologia. Em conclusão, a técnica de nested PCR mostrou mais uma vez ser sensível em relação ao diagnóstico clínico e laboratorial convencional e a combinação da pontuação clínica e as técnicas de nested PCR ajuda no estabelecimento do diagnóstico definitivo das doenças fúngicas.
Abstract
Despite the advances made in the last decades regarding knowledge of the etiology, epidemiology and treatment of pneumonia, it still remains one of the major causes of morbidity and mortality worldwide. In Africa, especially where favorable climatic and geographical conditions associated with high rates of immunocompromised individuals, favors the development and dissemination of fungal etiological agents that cause these pathologies. Such predisposing factors are present in Mozambique and the occurrence of pneumocystosis (PCP) and / or histoplasmosis in the country is also verified. Although there are no publications on the prevalence of these fungal infections in Mozambique, there are descriptions of the occurrence of pneumonia caused by Pneumocystis jirovecii (Pj), as well as co-infection with other fungi such as Histoplasma capsulatum (Hc). However, in the majority of cases of pneumonia, the specific etiologic agents are not known, often giving more emphasis to PCP, due to the lack of means of diagnosis or studies that provide otherwise, which opens a field for the investigation and identification of other agents like H. capsulatum in the country. On the other hand, the knowledge of the epidemiological behavior of the diseases in the country, and of the etiological agents that cause pneumonia is fundamental so that it is possible to implement control and safety measures against these opportunistic pathologies In this study, 50 samples of bronchoalveolar lavage were analyzed, from patients suspected of hospitalized or observed pneumonia at Maputo Central Hospital (HCM), who were referred to the laboratory of Microbiology at Eduardo Mondlane University for processing. For the diagnosis, direct observation with the Gram and Giemsa staining techniques, staining by the Grocott method and finally the nested PCR were used to identify the etiologic agents present in the bronchoalveolar lavage samples. The tests were conducted in Mozambique and Brazil, following all ethical issues including confidentiality and anonymity. Of the 50 samples tested with the nested PCR, 13 were negative, 18 positive for H.capsulatum, 8 positive for P. jirovecii, and 11 with co-infections for both etiological agents. In agreement with the molecular results and the probability system, there was a concordance in 15 individuals with a high probability of having PCP (>83%), in approximately 66% (n =10) were positive in nested PCR, 2 positive by direct observation and 5 of them had fungal structures in histopathology. In conclusion, the nested PCR technique was once again sensitive to conventional clinical and laboratory diagnosis and the combination of clinical scores and nested PCR techniques helps to establish the definitive diagnosis of fungal diseases.
Keywords in Portuguese
HIVCoinfecção
Pneumocystis Carinii
Histoplasma
Pneumonia
Insuficiência Respiratória
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