Estudo do perfil de citocinas inflamatórias das doenças desmielinizantes adquiridas na faixa etária pediátrica em ambulatório especializado no estado do Rio de Janeiro

Abstract

Resumo: O grupo de Doenças Desmielinizantes Adquiridas (DDA) acomete o Sistema Nervoso Central (SNC) com base imunopatológica com produção de anticorpos à bainha de mielina. O diagnóstico é baseado em critérios clínico-radiológicos, sendo importante a busca por novas tecnologias para melhores diagnóstico e terapêutica. A avaliação da resposta inflamatória pode ser preditiva do curso evolutivo, sendo pouco explorada em pediatria. A proposta foi avaliar parâmetros clínico-neurológicos e perfis imunológicos nas DDA pediátricas para identificar biomarcadores dos quatro subtipos de DDA: Encefalomielite Disseminada Aguda (ADEM), Esclerose Múltipla Pediátrica (EMP), Síndrome Clínica Isolada (CIS) e Espectro da Neuromielite Óptica (NMOSD). Foi realizado um estudo prospectivo, longitudinal com portadores de DDA com até 18 anos de idade no Ambulatório de Doenças Desmielinizantes do IFF no período de 2012 a 2016. Os pacientes foram submetidos a exame neurológico evolutivo, Ressonância Magnética (RM) e coleta de sangue para pesquisa de citocinas. Foram admitidos 30 pacientes com 12 exclusões e 3 perdas totalizando 15 pacientes avaliados. O diagnóstico mais encontrado foi ADEM seguido de EMP. Os painéis de citocinas foram comparados através de análise estatística e categorizados de acordo com as comparações. Os resultados foram descritos em gráficos Heatmap, Boxplot e árvore de decisões. Foi relatado um caso sobre a evolução do diagnóstico de CIS para EMP. O perfil de citocinas séricas foi realizado por análise de microarranjo líquido (Luminex) totalizando 64 amostras de sangue avaliadas. A coorte apresentou cinco pacientes ADEM, cinco EMP, dois CIS e três NMOSD. No relato de caso da paciente ALAPL, não foi encontrada sincronia temporal entre a alteração do perfil de citocinas, da RM e da avaliação neurológica concluindo que avaliações inflamatória e clínica não anteciparam eventos de desmielinização e evolução para EMP. A correlação entre dosagens de citocinas mostrou um padrão multifuncional, com a participação de moléculas associadas ao perfil inflamatório Th1, Th2, Th17, Treg, e expressão aumentada de quimiocinas e citocinas envolvidas com proliferação de diversos tipos celulares. O padrão inflamatório mais abrangente e polifuncional, com 20 citocinas significativamente mais expressas, foi entre a EMP comparadas à ADEM. Na análise de citocinas entre ADEM e MNOSD houve uma diferença estatisticamente significativa para IL-7, IL-10 e GM-CSF, com uma expressão maior nas amostras de NMOSD. Entre CIS e ADEM, apenas MIP-1b se apresentou com uma diferença estatística nos dois grupos. A IP-10 se mostrou diferencialmente expressa em EMP quando comparada a CIS. Entre EMP e NMOSD, encontramos a eotaxina aumentada em EMP. Foram criadas quatro árvores classificatórias para o diagnóstico de DDA, definindo o perfil mínimo de citocinas capazes de identificar cada tipo de DDA. Concluímos que do ponto de vista diagnóstico as citocinas IL-2, IL-7, IL-13, Basic-FGF, MIP-1b, VEGF, Eotaxina, IP-10 e TNF-\F067 seriam capazes de classificar todos os pacientes DDA em seus grupos específicos. Estudos multicêntricos que permitam aumentar o número de pacientes com DDA poderão auxiliar na validação dos achados desse trabalho e definir pontos de cortes mais precisos para cada nível de citocina sérica visando ao diagnóstico diferencial de DDA em pediatria.