Imunologia aplicada ao desenvolvimento de novas estratégias de controle para as leishmanioses: uma abordagem terapêutica em leishmaniose tegumentar americana

Abstract

O objetivo deste estudo é avaliar o potencial imunomodulador de novas estratégias terapêuticas para Leishmaniose tegumentar americana (LTA). Os compostos ftalimídicos-triazólicos (RN1, RN2 e RN3) e o extrato bruto da microalga Chlorella vulgaris (CV) foram obtidos pelo método de Click Chemistry e sonicação, respectivamente. As drogas de referência (miltefosina-M e antimoniato de meglumina-AM) e Imiquimod (Im) também foram avaliadas para comparação. Os índices de seletividade (IS) foram obtidos através de ensaios de concentração inibitória (IC50), em formas promastigotas de Leishmania braziliensis, e concentrações citotóxicas (CC50), em células mononucleares do sangue periférico (PBMC) pelo método de MTT. A partir destas novas estratégias, foi realizada em PBMC de humanos saudáveis, a avaliação do potencial imunomodulador/ resposta imune por meio da expressão gênica (RT-qPCR), produção de citocinas (CBA-Citometria de fluxo) e óxido nítrico (NO).Verificou-se que o RN1 (IS=28,37) foi composto com a maior seletividade para o parasito (tornando-se o composto escolhido para os ensaios de resposta imune), o extrato natural da CV (IS=6,9) obteve resultados promissores por apresentar IS superior ao da droga de referência AM (IS=3,44), e a M (IS=156,36) foi a mais seletiva para o parasito. Ao verificar os dados de resposta imune, observou-se que as células tratadas com o RN1 apresentaram uma elevada expressão para os genes Tbx21, GATA3, RORc e NOS2, porém, observou-se uma supressão imunológica na síntese de citocinas perfil Th1 e Th2. A CV apresentou um perfil modulador, por estimular as citocinas do perfil Th1, mais do que as drogas de referência. O Im apresentou uma alta expressão para os genes Tbx21, GATA3, RORc e Foxp3, com aumento na produção apenas de TNF. Portanto, a CV e Im destacam-se como fortes candidatos terapêuticos ou adjuvantes contra a LTA, devido a modulação dos perfis da resposta imune, baixa toxicidade e ação tóxica sobre o parasito.