| Autor | Nascimento, Dilzamar V. | |
| Autor | Dellagostin, Odir A. | |
| Autor | Hirata Jr., Raphael | |
| Autor | Pereira, Geraldo M. B. | |
| Autor | Guaraldi, Ana Luiza Mattos | |
| Autor | Armôa, Geraldo R. Garcia | |
| Data de acesso | 2016-01-14T14:19:31Z | |
| Data de disponibilização | 2016-01-14T14:19:31Z | |
| Data do publicação | 2013 | |
| Citação | NASCIMENTO, Dilzamar V.; et al. Plasmid instability when the hsp60 gene promoter is used to express the protective non-toxic fragment B of the diphtheria toxin in recombinant BCG . American Journal of Molecular Biology, v.3, n.2, p.81-86, April 2013. | pt_BR |
| ISSN | 2161-6620 | |
| URI | https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/12531 | |
| Idioma | eng | pt_BR |
| Editor | Scientific Research Publishing | pt_BR |
| Direito Autoral | open access | |
| Título | Plasmid instability when the hsp60 gene promoter is used to express the protective non-toxic fragment B of the diphtheria toxin in recombinant BCG | pt_BR |
| Tipo do documento | Article | |
| DOI | 10.4236/ajmb.2013.32011 | |
| Resumo em Inglês | The genetic modification of the live attenuated Mycobacterium
bovis BCG to deliver a protective Corynebacterium
diphtheriae antigen in vivo could be a
safer and less costly alternative to the new and more
expensive DTP vaccines available today, in particular
to third world-countries. The stability of expression
of heterologous antigens in BCG, however, is a major
challenge to the use of live recombinant bacteria in
vaccine development and appears to be dependent to
a certain extent, on a genetic compatibility between
the expression cassette within the plasmid construct
and the mycobacterium host. In the quest for the best
recombinant BCG transformant to express the dtb
gene of C. diphtheriae we generated two new rBCG
strains by transforming the Moreau substrain of BCG
with the mycobacterial expression vectors pUS973 and
pUS977, each one carrying a different promoter to
drive the expression of the target antigen. After transformation
recombinant BCG clones were selected on
Middlebrook 7H10 kanamycin Agar plates, expanded
in Middlebrook 7H9 kanamycin Broth and analyzed
by agarose gel electrophoresis and immunoblotting.
rBCGs transformed with the construct carrying the
weak PAN promoter from M. paratuberculosis stably
expressed the dtb gene. Conversely, rBCGs transformed
with the construct carrying the strong mycobacterium
hsp60 promoter were unstable and consequently
unfit for the expression of the C. diphtheriae
gene. | pt_BR |
| Afiliação | Universidade do Estado do Rio de Janeiro. Faculdade de Ciências Médicas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. | pt_BR |
| Afiliação | Universidade Federal de Pelotas. Campus Universitário. Centro de Biotecnologia. Pelotas, RS, Brasil. | pt_BR |
| Afiliação | Universidade do Estado do Rio de Janeiro. Faculdade de Ciências Médicas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. | pt_BR |
| Afiliação | Universidade do Estado do Rio de Janeiro. Faculdade de Ciências Médicas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. | pt_BR |
| Afiliação | Universidade do Estado do Rio de Janeiro. Faculdade de Ciências Médicas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. | pt_BR |
| Afiliação | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. | pt_BR |
| Palavras-chave em inglês | BCG Vaccine | pt_BR |
| Palavras-chave em inglês | Recombinant BCG | pt_BR |
| Palavras-chave em inglês | Fragment B of Diphtheria Toxin | pt_BR |
| Palavras-chave em inglês | Anti-Diphtheria Vaccine | pt_BR |
| DeCS | Vacina BCG | pt_BR |
| DeCS | Corynebacterium diphtheriae | pt_BR |
| DeCS | Difteria | pt_BR |
| DeCS | Vacinas contra Difteria, Tétano e Coqueluche Acelular | pt_BR |
| e-ISSN | 2161-6663 | |
| xmlui.metadata.dc.subject.ods | 03 Saúde e Bem-Estar | |
