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https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/18765
Tipo de documento
DissertaçãoDireito Autoral
Acesso aberto
Data de embargo
2018-09-12
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INIBIÇÃO DO SISTEMA ANTIOXIDANTE PARASITÁRIO COMO ALVO CONTRA ESQUISTOSSOMOSE MANSÔNICA
Costa, Rafael Lima | Data do documento:
2014
Autor(es)
Orientador
Afiliação
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil
Resumo
A OMS estima que mais de 200 milhões de pessoas estejam infectadas por Schistosoma sp. no mundo, sendo que menos de 10% dessa população recebe tratamento adequado. No Brasil, a esquistossomose mansônica é endêmica na maioria dos estados, o número de casos confirmados aumentou mais de 100 vezes entre 1995 e 2010 segundo o Ministério da Saúde. Dentre os estados brasileiros, a Bahia apresenta maior área endêmica. Atualmente o tratamento é realizado pela administração de praziquantel e oxamniquina, porém existem relatos de redução da eficácia e resistência a estes fármacos o que aumenta a necessidade por novas drogas e regimes terapêutico. Uma possibilidade nesta busca corresponde a combinação de substâncias, desse modo o emprego de drogas quinolínicas que impedem a detoxificação do heme aliado à inibição do sistema antioxidante do parasito, devem aumentar os efeitos deletérios deste metabólito. Então, com objetivo de avaliar o efeito in vitro da cloroquina (CLQ – cristalização do heme) frente aos vermes adultos do Schistosoma mansoni, bem como do dietilditiocarbamato de sódio (DDC - inibidor da superóxido dismutase) tanto isoladas como combinadas. Para isso a citotoxicidade das drogas foi avaliada pela redução de MTT na cultura de esplenócitos, enquanto a atividade esquistossomicida foi determinada pela sobrevida de vermes adultos na presença das substâncias. Os danos na estrutura do parasito foram avaliados por microscopia eletrônica, enquanto os mecanismos de ação foram investigados pela inibição da formação de cristais de heme, bem como o aumento do estresse oxidativo por meio da avaliação da peroxidação lipídica e atividade da SOD. Desse modo, não observou-se toxicidade significativa pela CLQ e DDC em esplenócitos, e a dose efetiva para morte de 50% dos vermes (ED50) foi 24,3μM para CLQ e 63,1μM para DDC. A combinação das drogas foi mais efetiva na proporção de 4 unidades de CLQ para 1 de DDC, e avaliação ultraestrutural dos parasitos submetidos a esse tratamento evidenciou perda do tegumento, assim como na composição do trato digestório. As investigações bioquímicas realizadas demonstraram que esta proporção aumenta a peroxidação lipídica e inibe a formação de hemozoína drasticamente. Estes resultados apontam para uma nova possibilidade terapêutica para esquistossomose, que pode auxiliar no controle desta doença e no impacto social e econômico que provoca.
Resumo em Inglês
The WHO estimates that 200 millions of people are with Schistosoma sp. in the world, where less than 10% of this population receive appropriate treatment. In Brazil, the mansoni schistomiasis is endemic in vast area most states, the confirmed cases number augmented more than 100-fold between 1995 and 2010 according the Ministry of Health. Among the brazilian states, Bahia is the one with the greatest endemic area. Currently, the treatment is performed with praziquantel and oxamniquine, however there is reports efficacy reduced and resistance to these drugs. That increased the need for new drugs and therapeutic regimens to prevent the selection of resistant strains. A way into this quest is the combination of substances, thus use of quinoline drugs that stop heme detoxification, associated to inhibitors of antioxidant system of parasite, it’s may increases of deleterious effects of this metabolite. So, aiming to assess in vitro chloroquine effect (CLQ – inhibitor of heme aggregation) against to adult worms of Schistosoma mansoni, and sodium diethyldithiocarbamate (DDC - superoxide dismutase inhibitor), thus isolated as combined. The cytotoxicity was assess of MTT reduction in splenocytes cell culture, while the schistosomicide activity was define for survival of worms in presence of substances isolated and associated. The structure damages of parasite were evaluated by electronic microscopy, as mechanism of action were explored by inhibition of heme crystals formation, as well as increase oxidative stress via liperoxidation analysis and SOD activity. This way, not found significant toxicity by CLQ and DDC in splenocyte and effective dose lethal to 50% of worms (ED50) was 24.3μM to CLQ and 63.1μM DDC. The combination of drugs was more effective at ratio of 4 units of CLQ to 1 of DDC, and ultrastructure evaluation undergoing this treatment showed lost parasite tegument, as the composition of digestive tract. Biochemical investigations carried out have shown this proportion increases liperoxidation and inhibits hemozoin formation drastically. This data indicate a new therapeutic possibility to schistosomiasis that will help to fight with the economic and social impact of this disease.
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