Advisor | Romanha, Alvaro José | pt_BR |
Author | Ferraz, Marcela Lencine | pt_BR |
Access date | 2017-08-30T16:44:47Z | |
Available date | 2017-08-30T16:44:47Z | |
Document date | 2009 | |
Citation | FERRAZ, Marcela Lencine. Caracterização de potenciais alvos moleculares e teste de fármacos candidatos ao tratamento da doença de Chagas experimental. 2009. 175 f. Tese (Doutorado em Ciencias área de concentração Biologia Celular e Molecular)-Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz.Programa de Pós Graduação em Ciências da Saúde, Centro de Pesquisas René Rachou, Fundação Oswaldo Cruz, Belo Horizonte, 2009 | pt_BR |
URI | https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/20834 | |
Abstract in Portuguese | No ano de comemoração do centenário de de
scoberta da doença de Chagas ainda são
muitos os desafios e as dificuldades na
busca de novas alternativ
as eficazes para o
tratamento da doença. O objetivo deste
trabalho foi caracterizar potenciais alvos
moleculares e testar fármacos candidatos para o tratamento da doença de Chagas. Como
alvos foram analisadas três enzimas:
a Tiol Transferase (Tc52), a Glutamato
Desidrogenase (TcGluDH) e a Aldo/ceto Reduta
se (TcAKR), selecionadas a partir de
prévias análises de genômica e proteômica em cepas de
Trypanosoma cruzi
sensíveis e
resistentes ao Benzonidazol. Como poten
ciais fármacos, foram escolhidos três
medicamentos: o Tamoxifeno, a Amiodarona e o Ravuconazol, testados
in vitro
e
in vivo,
nas fases aguda e crônica da doença de Ch
agas experimental. Para os testes
in vivo
os
fármacos foram utilizados isoladamente ou em combinação. Adicionalmente, foi avaliado
o efeito cooperativo do sistema imune na at
ividade dos inibidores
da biossíntese de
ergosterol, Posaconazol e Ravuconazol. Os
resultados mostraram que apenas a TcGluDH
foi diferencialmente expressa, apresenta
ndo uma menor expressão
da proteína e do
respectivo mRNA nas cepas re
sistentes ao Benzonidazol em comparação com as cepas
sensíveis. Para TcAKR não foi possível completar a caracterização, mas observamos um
aumento no nível de mRNA nas cepas resist
entes analisadas quando comparada com as
sensíveis. Não houve correlação entre a expres
são da Tc52 e o fenótipo de resistência a
fármacos do
T. cruzi.
Nos testes de fármacos, as melhores resultados foram obtidos com a
associação Ravuconazol e Amiodarona: 60%
de cura e 90% de
sobrevivência dos
camundongos infectados e tratados nas fase
s aguda e crônica. A associação entre
Amiodarona e Benzonidazol não gerou efeito
sinérgico ou aditivo na
cura da doença de
Chagas experimental. O Tamoxifeno apesar
de ter se mostrado
potente nos testes
in vitro
foi inativo
in vivo.
Com relação a avaliação da coopera
ção do sistema imune na atividade
do Posaconazol, nossos resultados mostraram uma nítida influência dos diferentes tipos de
linfócitos na atividade desse fármaco assim
como para o Benzonidazol. Provavelmente,
esse efeito foi devido a ação preferencial de
sses fármacos sobre diferentes estágios do
parasito, em cooperação com diferentes el
ementos do sistema imune. A utilização de
camundongos knockout mostrou que a ausência de Interferon-
reduziu a atividade do
Ravuconazol e Benzonidazol. O presente trabalho
abre perspectivas para serem exploradas. | pt_BR |
Language | por | pt_BR |
Rights | open access | pt_BR |
Subject in Portuguese | Doença de Chagas | pt_BR |
Subject in Portuguese | Trypanosoma cruzi | pt_BR |
Subject in Portuguese | Trypanosoma cruzi | pt_BR |
Subject in Portuguese | Mecanismos moleculares de ação farmacológica | pt_BR |
Title | Caracterização de potenciais alvos moleculares e teste de fármacos candidatos ao tratamento da doença de Chagas experimental | pt_BR |
Type | Thesis | pt_BR |
Defense date | 2009 | pt_BR |
Defense Institution | Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou | pt_BR |
Place of Defense | Belo Horizonte/MG | pt_BR |
Program | Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde | pt_BR |
Abstract | In the year of commemoration of the centenary
of Chagas disease discovery, the challenges
and difficulties in the search of new efficien
t alternatives for the treatment of the illness
still remain. The objectives of this work were to characterize potential molecular targets
and test drugs candidates for the treatment of
the Chagas disease. Three potential targets
had been selected: Thiol Transferase (Tc5
2), Glutamate Dehidrogenase (TcGluDH) and
the Aldo/Keto Reductase (TcAKR). They we
re pointed out by genomic and proteomic
analysis of Benznidazole
susceptible and resistant
Trypanosoma cruzi
strains. As potential
drugs, three medicines had been chosen: Ta
moxifen (TAM), Amiodarone (AMIO) and
Ravuconazole (RAVU). They were tested
in vitro
and
in vivo
, in the acute and chronic
phases of the experimental Chagas disease. For the tests
in vivo
the drugs had been used
separately or in combination. Additionally, we
evaluate the cooperative effect of the host
immune system in the activity of inhibitors of
the biosynthesis of ergosterol, Posaconazole
(POS) and RAVU. The results show that only
the TcGluDH was differentially expressed,
presenting a reduction in the prot
ein expression and mRNA levels in resistant strains to
Benznidazole. Although a complete characteri
zation of TcAKR could not be reached, we
observe difference in the mRNA levels in
the strains analyzed. However no correlation
between the expression of the Tc52 and resist
ance phenotype was observed. In the tests of
drugs, the highest activities were observed fo
r RAVU and AMIO associ
ation: 60% of cure
and 90% of survival of the infected and trea
ted mice in the chronic phase. The association
between AMIO and BZ generate neither synerg
ic or additive effect in the cure of the
experimental Chagas disease.
Although TAM presen
ted high activity
in vitro
it was
inactive
in vivo
. In regard to cooperation effect
of the host immune system a clear
influence of the lymphocytes were observed
on the activity of POS and BZ. Our results
show that the absence of different lymphocyt
es activities has dist
inct effects on the
efficacy of POS and BZ in th
e treatment of murine acute
T. cruzi
infection. Probably, this
effect had the preferred stock of these drugs
on different parasite
stages, in cooperation
with different elements of the immune syst
em. The use of knockout mice showed that the
absence of gamma interferon reduced the R
AVU and BZ activities. The present work
considers new alternatives for the Chagas di
sease chemotherapy, and opens perspectives to
be further explored | pt_BR |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Belo Horizonte, MG, Brasil. | pt_BR |
Member of the board | Romanha, Alvaro José | pt_BR |
Member of the board | Bahia, Maria Terezinha | pt_BR |
Member of the board | Soeira, Maria Nazaré | pt_BR |
Member of the board | Oliveira, Jaqueline Germano de | pt_BR |
Member of the board | Pais, Fabiano Sviatopolk Mirsky | pt_BR |