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dc.contributor.advisorBordignon, Juliano
dc.contributor.authorArruda, Thaís Bonato de
dc.date.accessioned2019-03-12T15:19:27Z
dc.date.available2019-03-12T15:19:27Z
dc.date.issued2018
dc.identifier.citationARRUDA, Thaís Bonato de. Análise do perfil clínico e imunológico de pacientes com dengue em fase aguda na região norte do Paraná. 2018. 120 f. Dissertação (Mestrado em Biociências e Biotecnologia) - Instituto Carlos Chagas, Fundação Oswaldo Cruz, Curitiba, 2018.
dc.identifier.urihttps://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/32041
dc.description.abstractA dengue é uma doença multifatorial causada pela infecção por um dos quatro sorotipos do vírus da dengue (DENV 1-4). Neste trabalho avaliou-se diferentes características (viremia, citocinas e sorotipo viral) da infecção por DENV em pacientes do município de Cambé, região Norte do Paraná. Para tanto, foram obtidas 888 amostras de soros de pacientes com suspeita clínica de infecção, provenientes de unidades de pronto atendimento de Cambé, durante os anos de 2013 e 2014. As análises sorológicas (ELISA anti-IgM, anti-IgG e NS1) demonstraram que 264 representavam casos de infecção aguda (NS1+ e/ou IgM+). Observou-se uma correlação positiva entre condições climáticas (pluviosidade e temperatura) e a densidade populacional do mosquito vetor com a incidência da doença. A média de idade dos pacientes com dengue foi de 33 anos, e não houve prevalência de infecção de acordo com a cor ou gênero. Adicionalmente, os sintomas mais frequentes foram febre (87%), cefaléia (78%) e mialgia (70%), e observou-se uma baixa prevalência de sinais hemorrágicos (6%). O isolamento viral em células C6/36 confirmou a presença da partícula viral em 145 das 264 (55%) amostras. Além disso, houve uma alta correspondência entre as técnicas de ELISA NS1 e a detecção da partícula viral. Ademais, o sorotipo viral foi determinado em 138 das 145 amostras positivas para o isolamento viral pela técnica de RT-PCR One Step. Deste modo, observou-se a soroprevalência do sorotipo-1 do DENV (137 amostras) no período do estudo, com apenas uma amostra de DENV-4. Ainda, 7 amostras não foram amplificadas pelo protocolo de análise e estão sendo testadas com outros primers e para outros vírus. Adicionalmente, a viremia foi determinada pela técnica de titulação em células C6/36 nas amostras com sorotipo viral definido (138). Nestes pacientes, a viremia média foi de 1,0 x 105 FFUC6/36/mL, sendo esta mais alta nos primeiros três dias da doença. Adicionalmente, determinou-se os níveis de citocinas inflamatórias no soro destes pacientes e pode-se observar um perfil misto Th1/Th2, marcado pela produção aumentada de IFN-γ, IL-6 e IL-4 nos pacientes com dengue comparado aos saudáveis. Finalmente, com o sequenciamento da região codificadora da proteína E seguida de análise filogenética demonstrou a co-circulação de duas linhagens (1b e 2) de DENV-1 de genótipo V em Cambé no período de estudo. Assim, conclui-se que diversos fatores podem influenciar na incidência e na patologia da dengue. Deste modo, a análise combinada de fatores epidemiológicos, bem como a caracterização de cepas virais e da resposta imune dos pacientes, é capaz de contribuir para o esclarecimento dos diferentes aspectos envolvidos na imunopatologia da dengue, e no surgimento de novos surtos da doença.
dc.language.isopor
dc.publisherFundação Oswaldo Cruz. Instituto Carlos Chagas.
dc.rightsopen access
dc.subject.otherDengue
dc.subject.otherEpidemiologia
dc.subject.otherAlergia e Imunologia
dc.subject.otherFilogenia
dc.subject.otherInflamação
dc.titleAnálise do perfil clínico e imunológico de pacientes com dengue em fase aguda na região norte do Paraná
dc.typeDissertation
dc.degree.date2018
dc.degree.grantorFundação Oswaldo Cruz. Instituto Carlos Chagas
dc.degree.levelMestrado Acadêmico
dc.degree.localCuritiba
dc.degree.programPrograma de Pós-Graduação em Biociências e Biotecnologia
dc.contributor.advisorcoSilveira, Guilherme Ferreira
dc.description.abstractenDengue is a multifatorial pathology caused by the infection with one of the four dengue virus serotypes (DENV 1-4). The present study aimed to evaluate distinct characteristics of DENV infection (viremia, cytokines and viral serotype) in Cambé city, northern Paraná. Thus, in 2013 and 2014, 888 sera samples from patients with clinical suspicion of dengue infection were collected from emergency care units in Cambé. The serological results (ELISA anti-IgM, anti- IgG and NS1) classified 264 samples as acute phase dengue (NS1+ and/or IgM+). It was observed a positive correlation between climate conditions (pluviosity and temperature), population density of the vector, and dengue cases. Besides, the median age of dengue patients was 33 years old, and there was no differential incidence by skin color or gender. In addition, the most frequent symptoms were fever (87%), headache (78%) and myalgia (70%), and there was a low prevalence of bleeding signs (6%). Next, using the viral isolation technique in C6/36 cell line, the viral particle presence was confirmed in 145 of the 264 samples (55%). From these evaluations, we observed a strong correspondence between the detection of NS1 and the presence of the viral particle. Furthermore, the viral serotype was determined on 138 from the 145 samples positive for the viral isolation using a RT-PCR One Step technique. This way, in the period of the study, it was observed a seroprevalence of DENV-1 (137 samples), with only one DENV-4. Also, 7 samples were not amplified by this assay, and they are going to be retested using other primers to dengue and for different virus. In addition, those serotyped samples had their viremia determined by titration in C6/36 cell line. These patients had a median viremia of 1.0 x 105 FFUC6/36/mL. which was higher in the first 3 days of the disease. Additionally, we measured the inflammatory cytokines levels from the dengue patients’ serum. From this evaluation, it was observed a mixed Th1/Th2 profile, which was defined by a higher production of both IFN-γ, IL-6 and IL-4 cytokines in dengue patients when compared with the healthy donors. Finally, with the sequencing of the coding region of the protein E followed by phylogenetic analysis, it was observed the co-circulation of two strains (1b and 2) of DENV-1 genotype V in Cambé, during the study period. In conclusion, the combined analysis of epidemiological factors, as well as the characterization of viral strains and the immune response of the patients contribute to elucidate the different aspects involved in dengue immunopathogenesis and in the arise of new outbreaks of the disease.
dc.creator.affilliationFundação Oswaldo Cruz. Instituto Carlos Chagas. Curitiba, PR, Brasil.
dc.subject.enEpidemiology
dc.subject.enAllergy and Immunology
dc.subject.enPhylogeny
dc.subject.enInflammation
dc.subject.esEpidemiología
dc.subject.esAlergia e Inmunología
dc.subject.esInflamación
dc.subject.decsEpidemiologia
dc.subject.decsAlergia e Imunologia
dc.subject.decsFilogenia
dc.subject.decsInflamação
Appears in Collections:PR - ICC - Dissertações de Mestrado

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