Investigação do potencial efeito farmacológico de nanopartículas contendo α-bisabolol em modelo de inflamação pulmonar aguda induzida por LPS

Abstract

A síndrome do desconforto respiratório agudo (SDRA) é caracterizada por uma inflamação pulmonar aguda com intenso infiltrado neutrofílico associado a dano alveolar difuso e edema pulmonar. A falta de um tratamento específico e eficaz para essa doença promove a busca por alternativas terapêuticas atuantes na resolução da inflamação. Nesse contexto, os produtos naturais e seus derivados têm papel de destaque para as descobertas de princípios ativos eficazes para novas terapias. O \03B1-bisabolol (\03B1-bis), um óleo natural extraído de plantas como a Matricaria chamomilla, possui propriedades anti-inflamatória e antioxidante, entretanto possui atividade apenas em doses elevadas (acima de 100 mg/Kg). Além disso, devido seu caráter hidrofóbico, apresenta algumas dificuldades na administração. A nanotecnologia associada à vetorização de fármacos tem sido amplamente difundida por estar associada ao aumento de eficácia e à diminuição de efeitos adversos. Dessa forma, o presente estudo investigou o potencial efeito anti-inflamatório do \03B1-bis nanoencapsulado (\03B1-bis NC), em modelos in vitro e in vivo de inflamação induzida por LPS. As nanocápsulas brancas (NC brancas) foram utilizadas como controle de veículo. Inicialmente, foi avaliada a ativação e viabilidade celular em cultura de macrófagos alveolares estimulados com LPS (1\03BCg/ mL) e pré-tratados com diferentes concentrações de \03B1-bis livre ou \03B1-bis NC (1, 5 e 25 \03BCM) Em seguida, camundongos A/J machos foram tratados, por via oral, com \03B1-bis ou \03B1-bis NC nas doses de 30, 50 e 100 mg/Kg 4 h antes da provocação com LPS por instilação intranasal (25 \03BCg/25 \03BCl). Medidas de elastância pulmonar foram avaliadas por pletismografia barométrica invasiva. A quantificação de mediadores inflamatórios no tecido pulmonar foi realizada por ELISA e o infiltrado neutrofílico foi estimado pela atividade da enzima de mieloperoxidase no tecido, por contagem total e diferencial de leucócitos no lavado broncoalveolar (LBA), além da análise histológica por score em coloração com H&E. O envolvimento das vias de sinalização MAPK (ERK1/2, JNK e p38) foi avaliado por Western blotting. Os resultados demonstram que as NC brancas não causaram alterações significativas em nenhum dos parâmetros analisados. O \03B1-bis livre apresentou efeitos significativos na redução da quimiocina MIP-2 e atividade da mieloperoxidase apenas na maior dose (100 mg/Kg). Entretanto, o \03B1-bis NC reduziu significativamente o acúmulo de neutrófilos no tecido e no LBA em todas as doses avaliadas, bem como reduziu a hiper-reatividade pulmonar. Além disso, os níveis aumentados de KC, MIP-1 e MIP-2 foram reduzidos significativamente nos animais tratados com \03B1-bis NC. Foi também observado uma redução significativa nos níveis de fosforilação das proteínas ERK1/2, p38 e JNK, indicando uma inibição da via das MAPK em animais pré-tratados com \03B1-bis NC na dose de 50 mg/Kg Na quantificação de \03B1-bis no tecido pulmonar por HPLC, observou-se que a nanoencapsulação possibilitou um aumento na quantidade de \03B1-bisabolol no tecido inflamado, apresentando concentrações do óleo 6, 20 e 16 vezes maiores nas doses de 30, 50 e 100 mg/Kg, respectivamente, quando comparados ao óleo administrado em sua forma livre. Em conjunto, os resultados sugerem que o tratamento com o \03B1-bis NC apresentou maior eficácia terapêutica em relação à sua forma livre. A modulação do cenário inflamatório pode estar relacionada com o aumento da biodisponibilidade do princípio ativo determinado pelo sucesso na vetorização do \03B1-bis pelas nanocápsulas.