Efeito das Redes Extracelulares de Neutrófilos sobre a infecção pela HIV-1 em macrófagos

Abstract

Os neutrófilos liberam Redes Extracelulares (NETs, do inglês Neutrophil Extracellular Traps) após interação com microrganismos e produtos fisiológicos ou sintéticos, entre outros. As NETs são constituídas por cromatina descondensada complexada com proteínas citoplasmáticas e nucleares, algumas delas com propriedades microbicidas. Como as redes extracelulares, liberadas no microambiente tecidual, podem modular o funcionamento das células-alvo do HIV-1, nosso objetivo foi verificar se as NETs poderiam modificar a replicação do HIV-1 em macrófagos. Neste estudo, nós vimos que a exposição de macrófagos infectados pelo HIV-1 às NETs resultou em significativa inibição da replicação viral. Observamos que tanto NETs individuais quanto pools destas estruturas apresentaram este efeito inibitório, que também ocorreu quando as NETs foram adicionadas aos macrófagos antes da infecção. O efeito anti-HIV-1 foi independente de outros fatores solúveis liberados pelos neutrófilos ativados, mas condicionado à integridade molecular das NETs, pois o tratamento destas estruturas com protease ou DNase anulou esse efeito. Vimos que a elastase neutrofílica (NE) é um componente crítico neste fenômeno, tendo em vista que a sua inibição (inibidor farmacológico) aboliu o efeito anti-HIV-1 das NETs, e que a NE purificada reproduziu este efeito antiviral As NETs induziram a produção de RANTES e MIP-1\03B2 por macrófagos, sugerindo que estas \03B2-quimiocinas contribuem para o efeito anti-HIV-1 destas redes. Tanto as NETs quanto a NE diminuíram a síntese de transcritos unspliced do HIV-1, o que pode também explicar a queda da produção de vírions pelos macrófagos infectados. Ainda, vírions remanescentes liberados pelos macrófagos infectados expostos às NETs apresentaram significativa queda da sua infectividade. Em estudos com amostras clínicas, observamos que neutrófilos de pacientes infectados pelo HIV-1 liberam NETs após estimulo com IL-8, e que moléculas componentes das NETs (DNA e elastase) estão presentes no plasma desses pacientes. Finalmente, nossos resultados mostram que as NETs exercem um potente efeito inibitório sobre a replicação do HIV-1 em macrófagos, e sugerem que este mecanismo de imunidade inata é um importante fator endógeno de controle da infecção pelo HIV-1.