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AutorSilva-Gomes, Natália Lins
AutorRampazzo, Rita de Cássia Pontello
AutorMoreira, Claudia Maria do Nascimento
AutorPorcino, Gabriane Nascimento
AutorSantos, Cyndia Mara Bezerra dos
AutorKrieger, Marco Aurélio
AutorVasconcelos, Eveline Gomes
AutorFragoso, Stenio Perdigão
AutorMoreira, Otacilio C.
Fecha de acceso2020-04-21T15:35:39Z
Fecha de disponibilización2020-04-21T15:35:39Z
Fecha de publicación2020
ReferenciaSILVA-GOMES, Natália Lins et al. Knocking Down TcNTPDase-1 Gene Reduces in vitro Infectivity of Trypanosoma cruzi. Frontiers in Immunology, v. 11, n. 434, p. 1-12, 2020.pt_BR
ISSN1664-302Xpt_BR
URIhttps://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/40905
Idiomaporpt_BR
Derechos de autoropen access
Palabras clave en PortuguésTcNTPDase-1pt_BR
TítuloKnocking down TcNTPDase-1 gene reduces in vitro infectivity of Trypanosoma cruzipt_BR
Tipo del documentoArticle
DOI10.3389/fmicb.2020.00434
Resumen en InglésEcto-Nucleoside Triphosphate Diphosphohydrolases are enzymes that hydrolyze tri- and/or diphosphate nucleosides. Evidences pointed out to their participation in Trypanosoma cruzi virulence, infectivity, and purine acquisition. In this study, recombinant T. cruzi knocking out or overexpressing the TcNTPDase-1 gene were built, and the role of TcNTPDase-1 in the in vitro interaction with VERO cells was investigated. Results show that epimastigote forms of hemi-knockout parasites showed about 50% lower level of TcNTPDase-1 gene expression when compared to the wild type, while the T. cruzi overexpressing this gene reach 20 times higher gene expression. In trypomastigote forms, the same decreasing in TcNTPDase-1 gene expression was observed to the hemi-knockout parasites. The in vitro infection assays showed a reduction to 51.6 and 59.9% at the adhesion and to 25.2 and 26.4% at the endocytic indexes to the parasites knockout to one or other allele (Hygro and Neo hemi-knockouts), respectively. In contrast, the infection assays with T. cruzi overexpressing TcNTPDase-1 from the WT or Neo hemi-knockout parasites showed an opposite result, with the increasing to 287.7 and 271.1% at the adhesion and to 220.4 and 186.7% at the endocytic indexes, respectively. The parasitic load estimated in infected VERO cells by quantitative real time PCR corroborated these findings. Taken together, the partial silencing and overexpression of the TcNTPDase-1 gene generated viable parasites with low and high infectivity rates, respectively, corroborating that the enzyme encoded for this gene plays an important role to the T. cruzi infectivity.pt_BR
AfiliaciónFundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Biologia Molecular e Doenças Endêmicas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.pt_BR
AfiliaciónFundação Oswaldo Cruz. Instituto Carlos Chagas. Laboratório de Genômica Funcional. Curitiba, PR, Brasil.pt_BR
AfiliaciónFundação Oswaldo Cruz. Instituto Carlos Chagas. Laboratório de Biologia Molecular de Tripanossomatídeos. Curitiba, PR, Brasil.pt_BR
AfiliaciónUniversidade Federal de Juiz de Fora. Instituto de Ciências Biológicas. Laboratório de Estrutura e Função de Proteínas. Juiz de Fora, MG, Brasil.pt_BR
AfiliaciónFundação Oswaldo Cruz. Instituto Carlos Chagas. Laboratório de Genômica Funcional. Curitiba, PR, Brasil.pt_BR
AfiliaciónFundação Oswaldo Cruz. Instituto Carlos Chagas. Laboratório de Genômica Funcional. Curitiba, PR, Brasil.pt_BR
AfiliaciónUniversidade Federal de Juiz de Fora. Instituto de Ciências Biológicas. Laboratório de Estrutura e Função de Proteínas. Juiz de Fora, MG, Brasil.pt_BR
AfiliaciónFundação Oswaldo Cruz. Instituto Carlos Chagas. Laboratório de Biologia Molecular de Tripanossomatídeos. Curitiba, PR, Brasil.pt_BR
AfiliaciónFundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Biologia Molecular e Doenças Endêmicas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.pt_BR
Palavras clave en InglêsGene Knockout Techniquespt_BR
Palavras clave en Inglêspathogenicitypt_BR
Palavras clave en Inglêsinfectivitypt_BR
Palavras clave en InglêsEnzyme Activationpt_BR
Palavras claveTécnicas de Inactivación de Genespt_BR
Palavras clavepatogenicidadpt_BR
Palavras claveActivación Enzimáticapt_BR
DeCSTrypanosoma cruzipt_BR
DeCSTécnicas de Inativação de Genespt_BR
DeCSpatogenicidadept_BR
DeCSAtivação Enzimáticapt_BR


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