Validação do método de determinação do teor de ácido ascórbico em baixas concentrações

Abstract

O objetivo deste trabalho foi demonstrar que o método analítico em questão é apropriado para a determinação do teor do ácido ascórbico em baixas concentrações. A metodologia pode ser aplicada para analisar resíduos no fármaco em equipamentos de produção (validação de limpeza) e/ou análises em que o fármaco esteja presente como excipiente ou em baixas concentrações. A validação foi realizada seguindo os parâmetros preconizados pela RE nº899/03, da ANVISA tais como: especificidade, linearidade, precisão, exatidão, limite de detecção, limite de quantificação, intervalo e robustez. O estudo de validação é importante porque evidencia que um método é adequado e confiável para o uso pretendido. O método analítico empregou-se a técnica por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), com o uso de uma coluna de fase reversa Hypersil C18 (250 x 4,6 mm, 5\03BCm) em uma temperatura de 30º C, com um fluxo de 1,0 mL/min em um comprimento de onda 260 nm com um volume de injeção de 20 \03BCL e tempo de corrida de 30 minutos. A fase utilizada foi composta de uma solução de fosfato de potássio monobásico 6,8 g/L: Acetonitrila (250:750). A solução de tiossulfato de sódio foi utilizada como diluente para propiciar maior estabilidade das soluções analíticas. De acordo com os resultados dos parâmetros avaliados, todos os critérios de aceitação foram atendidos e deste modo à metodologia se mostrou apropriada para quantificar o ácido ascórbico no intervalo de 0,08 \03BCg/mL (limite de quantificação) a 3,2 \03BCg/mL de ácido ascórbico.