Estudo de parâmetros fisiológicos de Lutzomyia longipalpis: avaliação do efeito de compostos anti-Leishmania e determinação de idade

Abstract

As leishmanioses são doenças causadas por parasitos do gênero Leishmania, que são transmitidos pela picada de flebotomíneos. Para controle da transmissão e redução do número de casos é necessário integrar diferentes estratégias, especialmente as que visam o controle vetorial. Os flebotomíneos adultos obtêm energia a partir de açúcares de origem vegetal, e dada a importância dessa dieta, essa característica vem sendo utilizada na elaboração de ferramentas de controle usando iscas açucaradas tóxicas atraentes, ATSB's. Os parasitos desenvolveram formas de superar barreiras e sobreviver dentro do intestino do vetor até seu completo desenvolvimento, mas em estudos recentes verificamos que compostos com efeito antiparasitário in vitro também são capazes de reduzir a carga parasitária e a prevalência de infecção. Assim, estudamos o efeito de compostos sintéticos com atividade anti-Leishmania em diferentes aspectos da fisiologia de L. longipalpis, adicionando-os à dieta açucarada e buscando os candidatos mais promissores para uso em controle de transmissão, afetando a infecção dentro do vetor. Nos testes de atração/repulsão, identificamos que apenas 2 compostos tiveram efeito, um atrativo (L4) e um repulsivo (P9). Em experimentos de ingestão de dieta açucarada contendo drogas, verificamos que L1, L3, L4, L7, P8 e P10 demonstraram um efeito inibidor de alimentação. Quanto à preferência entre as dietas, verificamos que flebotomíneos preferiram a dieta contendo os compostos L2, L7, P8, P9 e P10 em comparação à dieta controle. Nos ensaios de longevidade, L6 e P8 reduziram o tempo médio de vida (TMV) em machos e L2 e P8 fizeram o mesmo em fêmeas. Não foram observados efeitos inibitórios na alimentação sanguínea das fêmeas nem na produção de ovos. O composto L2 foi capaz de reduzir a quantidade de L. amazonensis no intestino de L. longipalpis no 3º dia após a infecção. O composto L2 parece ser o melhor candidato para o desenvolvimento de uma isca açucarada que minimize a transmissão, por reduzir o TMV de fêmeas e afetar o número de parasitos na infecção. Outro aspecto estudado, que influencia na medida de capacidade vetorial, foi a determinação de idade de flebotomíneos adultos. Através da espectroscopia no infravermelho próximo conseguimos estimar a proporção de flebotomíneos com idade ≤ ou ≥ 8 dias pós emergência, com precisão de 83 a 97%. E por análise de marcadores moleculares, identificamos que os genes LL005905 e LL001619 exibem padrão de expressão idade-dependente em L. longipalpis, sendo possível construir um modelo com tendência linear em função da menor expressão desses genes em insetos mais velhos. Essas técnicas se mostraram mais eficientes na previsão de idade em comparação às técnicas clássicas