Papel das células T invariantes de mucosa (MAIT) na leishmaniose visceral

Abstract

O presente trabalho estudou o papel de células T invariantes de Mucosa, ou células MAIT, na leishmaniose visceral (LV) em humanos e em modelo experimental murino. Para tal, foram realizados estudos in vitro e ex vivo, utilizando-se sangue total de indivíduos saudáveis e com LV assintomática (AS) e em pacientes com LV clássica não grave (LV). Para avaliar o impacto do MR1 no parasitismo e na histopatologia do fígado e do baço de camundongos in vivo, bem como no recrutamento de células MAIT e linfócitos T convencionais para estes órgãos entre 3 e 6 semanas após a infecção foi utilizado o modelo de camundongo MR1 nocaute (MR1-/-). Os resultados obtidos em humanos demonstraram diminuição da frequência de células MAIT circulantes e redução da expressão de CD69 nestas células, em crianças com LV clássica. As culturas in vitro mostraram a capacidade das células MAIT em responder à Leishmania, por meio da produção de TNF- e IFN- , de modo dependente de MR1, enquanto que a produção de IL-10 foi MR1-independente, em indivíduos saudáveis e nos pacientes com LV clássica. Por outro lado, a ativação da produção de IL-17A, que também foi dependente de MR1, foi observada apenas no grupo de indivíduos com LV assintomática. Foi observado também que o bloqueio das respostas restritas ao MR1 ocasionou aumento da ativação de linfócitos T convencionais nas culturas no grupo AS. Com relação à atividade leishmanicida de monócitos e neutrófilos, o bloqueio da molécula MR1 gerou redução na produção de óxido nítrico (NO) por indivíduos do grupo AS e LV clássica. Além disso, a produção de NO por monócitos correlacionou-se à expressão de IFN- por células MAIT. Em ensaios de co-cultivo foi possível comprovar a ativação de células MAIT restritas ao MR1-5-OP-RU em resposta a células infectadas com Leishmania, e a dependência do MR1. Nos ensaios in vivo, em comparação a camundongos selvagens, os camundongos MR1-/- apresentaram maior parasitismo no fígado 3 semanas após a infecção e no baço, 4 e 6 semanas após a infecção. Adicionalmente, camundongos MR1-/- apresentaram inflamação portal (fígado) significativa entre 3-6 semanas após a infecção. No baço, as análises histopatológicas demonstraram aumento das áreas de linfócitos T em camundongos selvagens infectados com L. donovani e camundongos MR1-/-, entre a terceira e a sexta semana após a infecção. O número de células MAIT no fígado dos camundongos selvagens infectados com L. donovani foi inversamente proporcional ao parasitismo neste órgão e um maior recrutamento de células T CD8+ convencionais foi observado no fígado e no baço após 4 e 6 semanas de infecção, respectivamente. De modo geral, os resultados demonstraram que as células MAIT podem ser ativadas no curso da LV, de modo dependente ou independente de MR1 e contribuir no microambiente da infecção como importante fonte de citocinas pró-inflamatórias e na ativação de mecanismos leishmanicidas de macrófagos. Além disso, os resultados apresentados neste trabalho representam a primeira evidência existente na literatura acerca da participação das células MAIT na resposta imunológica à Leishmania.