Author | Viana, Kelvinson Fernandes | |
Author | Aguiar-Soares, Rodrigo Dian Oliveira | |
Author | Roatt, Bruno Mendes | |
Author | Resende, Lucilene Aparecida | |
Author | Lemos, Denise da Silveira | |
Author | Oliveira, Rodrigo Corrêa de | |
Author | Martins Filho, Olindo Assis | |
Author | Moura, Sandra Lima | |
Author | Zanini, Marcos Santos | |
Author | Araújo, Márcio Sobreira Silva | |
Author | Reis, Alexandre Barbosa | |
Author | Giunchetti, Rodolfo Cordeiro | |
Access date | 2023-07-06T17:04:41Z | |
Available date | 2023-07-06T17:04:41Z | |
Document date | 2013 | |
Citation | VIANA, Kelvinson Fernandeset al. Analysis using canine peripheral blood for establishing in vitro conditions for monocyte differentiation into macrophages for Leishmania chagasi infection and T-cell subset purification. Veterinary Parasitology, v. 198, n. 1-2, p. 62-71, 2013. | en_US |
ISSN | 0304-4017 | en_US |
URI | https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/59444 | |
Language | eng | en_US |
Publisher | Elsevier | en_US |
Rights | restricted access | |
Title | Analysis using canine peripheral blood for establishing in vitro conditions for monocyte differentiation into macrophages for Leishmania chagasi infection and T-cell subset purification | en_US |
Type | Article | |
DOI | 10.1016/j.vetpar.2013.08.014 | |
Abstract | Canine visceral leishmaniasis (CVL) is a parasitic disease endemic in many countries, and dogs present as the major natural reservoir of the parasite, Leishmania chagasi (syn. L. infantum). Biomarkers in the canine immune system is an important technique in the course of developing vaccines and treatment strategies against CVL New methodologies for studying the immune response of dogs during Leishmania infectijon and after receiving vaccines and treatments against CVL would be useful. In this context, we used peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) from healthy dogs to evaluate procedures related to (i) establishment of in vitro conditions of monocytes differentiated into macrophages infected with L. chagasi and (ii) purification procedures of T-cell subsets (CD4(+) and CD8(+)) using microbeads. Our data demonstrated that after 5 days of differentiation, macrophages were able to induce significant phagocytic and microbicidal activity after L chagasi infection and also showed increased frequency of parasitism and a higher parasite load. Although N-acetyl-beta-D-glucosaminidase (NAG) levels presented similar levels of macrophage culture and L. chagasi infection, a progressive decrease in myeloperoxidase (MPO) levels was a hallmark over 5 days of culture. High purity levels (>90%) of CD4 and CD8 T cells were obtained on a magnetic separation column. We concluded that monocytes differentiated into macrophages at 5 days and displayed an intermediate frequency of parasitism and parasite load 72 h after L. chagasi infection. Furthermore, the purification system using canine T-lymphocyte subsets obtained after 5 days of monocyte differentiation proved efficient for CD4 or CD8 T-cell purification (>= 90%). The in vitro analysis using L. chagasi-infected macrophages and purified T cells presented a prospective methodology that could be incorporated in CVL vaccine and treatment studies that aim to analyze the microbicidal potential induced by specific CD4(+) and/or CD8(+) T cells. Crown. | en_US |
Affilliation | Universidade Federal de Minas Gerais. Departamento de Morfologia. Laboratório de Biologia das Interações Celulares. Belo Horizonte, MG, Brazil / Universidade Federal do Tocantins. Departamento de Ciências Agrárias e Tecnológicas. Laboratório de Biotecnologia. Gurupi, TO, Brazil / Universidade Federal de Ouro Preto. Instituto de Ciências Exatas e Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas. Laboratório de Imunopatologia. Ouro Preto, MG, Brazil. | en_US |
Affilliation | Universidade Federal de Ouro Preto. Instituto de Ciências Exatas e Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas. Laboratório de Imunopatologia. Ouro Preto, MG, Brazil. | en_US |
Affilliation | Universidade Federal de Ouro Preto. Instituto de Ciências Exatas e Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas. Laboratório de Imunopatologia. Ouro Preto, MG, Brazil. | en_US |
Affilliation | Universidade Federal de Minas Gerais. Departamento de Morfologia. Laboratório de Biologia das Interações Celulares. Belo Horizonte, MG, Brazil / Universidade Federal de Ouro Preto. Instituto de Ciências Exatas e Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas. Laboratório de Imunopatologia. Ouro Preto, MG, Brazil. | en_US |
Affilliation | Universidade Federal de Minas Gerais. Instituto de Ciências Biológicas. Departamento de Parasitologia. Laboratório de Imunologia e Genômica de Parasitos. Belo Horizonte, MG, Brazil. | en_US |
Affilliation | Universidade Federal de Ouro Preto. Instituto de Ciências Exatas e Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas. Laboratório de Imunopatologia. Ouro Preto, MG, Brazil. | en_US |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisa René Rachou. Laboratório de Biomarcadores de Diagnóstico e Monitoração. Belo Horizonte, MG, Brazil. | en_US |
Affilliation | Universidade Federal de Ouro Preto. Instituto de Ciências Exatas e Biológicas. Laboratório de Imunoparasitologia. Núcleo de Pesquisas em Ciências. Ouro Preto, MG, Brazil. | en_US |
Affilliation | Universidade Federal do Espírito Santo. Departamento de Medicina Veterinária. Laboratório de Microbiologia e Zoonoses. Alegre, ES, Brazil. | en_US |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisa René Rachou. Laboratório de Biomarcadores de Diagnóstico e Monitoração. Belo Horizonte, MG, Brazil. | en_US |
Affilliation | Universidade Federal de Ouro Preto. Instituto de Ciências Exatas e Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas. Laboratório de Imunopatologia. Ouro Preto, MG, Brazil / Universidade Federal de Ouro Preto. Escola de Farmácia. Departamento de Análises Clínicas. Ouro Preto, MG, Brazil. | en_US |
Affilliation | Universidade Federal de Minas Gerais. Departamento de Morfologia. Laboratório de Biologia das Interações Celulares. Belo Horizonte, MG, Brazil / Universidade Federal de Ouro Preto. Instituto de Ciências Exatas e Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas. Laboratório de Imunopatologia. Ouro Preto, MG, Brazil / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisa René Rachou. Laboratório de Imunologia Celular e Molecular. Belo Horizonte, MG, Brazil / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisa René Rachou. Laboratório de Biomarcadores de Diagnóstico e Monitoração. Belo Horizonte, MG, Brazil. | en_US |
Subject | Canine visceral leishmaniasis | en_US |
Subject | Leishmania chagasi | en_US |
Subject | In vitro microbicidal analysis | en_US |
Subject | Macrophage | en_US |
Subject | CD4 and CD8 T cells | en_US |
Embargo date | 2030-12-31 | |