Aperfeiçoamento de um teste imunoenzimático para o diagnóstico da hepatite A

Abstract

A hepatite A constitui um problema de saúde pública, principalmente nas cidades em desenvolvimento, onde o número de jovens e adultos susceptíveis à infecção é grande, portanto emerge como uma nova doença com alto potencial em causar epidemias. A hepatite A é transmitida através de água e alimentos contaminados. O diagnóstico rápido, específico e seguro, utilizando um teste acessível é extremamente importante para o controle de surtos da doença. Neste trabalho, foi aperfeiçoado um teste imunoenzimático (ELISA) para detecção de anticorpos da classe IgM contra o vírus da hepatite A (HAV), desenvolvido na FIOCRUZ, o qual utiliza misturas de soros humanos convalescentes conjugados à peroxidase e antígeno viral, altamente instável, produzido em cultura de células. O desenho original do teste ELISA IgM ANTI-HAV CAPTURA DIRETO/ IOC foi modificado para um ELISA de captura indireto pela introdução de um conjugado anti-IgG humana comercial e o uso de antígeno viral liofilizado. Foi também desenvolvido um simples e inteiramente novo ELISA direto que utiliza uma proteína recombinante, produzida em Escherichia coli, tendo como vantagens a estabilidade da proteína recombinante e principalmente a não utilização da mistura de soros humanos anti-HAV, como insumo. O novo ELISA IgM ANTI-HAV – PROTEÍNA RECOMBINANTE/EXPERIMENTAL mostrou ser promissor e a utilização da proteína recombinante otimizou o ELISA para detecção anticorpos anti-HAV IgM.