Detecção rápida da tuberculose multirresistente por método molecular

Abstract

De acordo com a Organização Mundial de Saúde (OMS), a tuberculose é classificada como tuberculose droga resistente (TB-DR) quando o isolado de Mycobacterium tuberculosis (MTB) apresenta resistência a qualquer um dos fármacos testados e tuberculose multirresistente (TB-MDR) quando o isolado do MTB apresenta resistência à, pelo menos, isoniazida (INH) e rifampicina (RIF) simultaneamente. A resistência à RIF tem sido associada a mutações no gene rpoB (códons 531, 526 e 516) e a resistência a INH têm sido relacionadas aos genes katG, inhA, ahpCe kasA, sendo a mutação no códon 315 do gene katG, a mais citada para resistência a este fármaco. Neste contexto, métodos moleculares têm sido propostos para a detecção de mutações gênicas em isolados de MTB que possam estar associadas à resistência aos fármacos RIF e INH a fim de agilizar o diagnóstico da TB-DR e intervir na cadeia de transmissão da doença. O presente estudo avaliou o desempenho da PCR multiplex alelo específico (MAS-PCR) na detecção de TB-DR e TB-MDR. A metodologia, MAS-PCR teve como alvos os genes rpoB, katG e inhA-15. Os resultados foram comparados com o método fenotípico e genotípico “padrão ouro” TSA-MGIT960 e Sequenciamento de DNA respectivamente. A MAS-PCR foi capaz de detectar a resistência gênica em 95,4% dos casos investigados. A concordância entre os métodos molecular foram avaliadas utilizando o software. “R” versão 3.6. Nossos resultados demonstram que a técnica, MAS-PCR pode ser uma boa ferramenta de triagem para a detecção da TB-DR e TB-MDR