Author | Cantelli, Carina Pacheco | |
Author | Teixeira, Maria da Gloria Martins | |
Author | Santos, Eneida Almeida | |
Author | Silva Jr, Haroldo Cid da | |
Author | Mouta Jr, Sergio da Silva e | |
Author | Pimenta, Marcia Maria Araújo | |
Author | Vianna, Carlos Otávio Alves | |
Author | Souza, Natália Plínio de | |
Author | Batoreu, Nádia Maria | |
Author | Galler, Ricardo | |
Author | Moraes, Marcia Terezinha Baroni de | |
Access date | 2024-07-25T18:12:21Z | |
Available date | 2024-07-25T18:12:21Z | |
Document date | 2009 | |
Citation | CANTELLI, Carina Pacheco et al. Generation of monoclonal antibodies against human recombinant interferon beta using genetic immunization with simultaneous expression of IgM and IgG isotypes. Hybridoma, v. 28, n. 3, p. 211-214, 2009. | en_US |
ISSN | 1554-0014 | en_US |
URI | https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/65172 | |
Language | eng | en_US |
Publisher | Mary Ann Liebert | en_US |
Rights | closed access | en_US |
Title | Generation of monoclonal antibodies against human recombinant interferon beta using genetic immunization with simultaneous expression of IgM and IgG isotypes | en_US |
Type | Article | en_US |
DOI | 10.1089/hyb.2008.0094 | |
Abstract | Monoclonal antibodies (MAbs) against human recombinant interferon beta (hrIFNbeta) were generated by genetic immunization (GI). In order to test two viral promoters frequently used in mammalian expression plasmid vectors, mice were inoculated four times by intramuscular injection, without adjuvant, with 100 microg of either pcDNA 3.1hrIFNbeta or pZeoSV2IFNbeta containing the entire human interferon beta gene and under the control of, respectively, human cytomegalovirus (HCMV) immediate-early promoter or early SV-40 enhancer/promoter. Only serum samples from mice immunized with pZeoSV2IFNbeta were positive to anti-hrIFNbeta. The spleens of the immunized mice were fused with myeloma Sp2/0 cells and the hybridoma clones generated screened by an in house enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Fourteen MAbs were selected as reactive with hrIFNbeta. Western blot analysis was performed and only one recognized the 18 kDa isoform (non-glycosylated) of hrIFNbeta. All MAbs were subjected to antibody isotype characterization with a commercial ELISA and showed unusual profile with simultaneous expression of both IgM and IgG2a isotypes. This observation is further supported by RT-PCR amplification of the IgM CH4 domain using total RNA from hybridomas. | en_US |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos (Bio-Manguinhos). Laboratório de Tecnologia Recombinante. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. | en_US |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos (Bio-Manguinhos). Laboratório de Tecnologia Recombinante. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. | en_US |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos (Bio-Manguinhos). Laboratório de Tecnologia Recombinante. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. | en_US |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos (Bio-Manguinhos). Laboratório de Tecnologia Recombinante. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. | en_US |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos (Bio-Manguinhos). Laboratório de Tecnologia Recombinante. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. | en_US |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos (Bio-Manguinhos). Laboratório de Anticorpos Monoclonais. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. | en_US |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos (Bio-Manguinhos). Laboratório de Tecnologia Recombinante. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. | en_US |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos (Bio-Manguinhos). Laboratório de Tecnologia Recombinante. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. | en_US |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos (Bio-Manguinhos). Programa Biofarmacêutico. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. | en_US |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos (Bio-Manguinhos). Vice-diretoria de Desenvolvimento Tecnológico. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. | en_US |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos (Bio-Manguinhos). Laboratório de Tecnologia Recombinante. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. | en_US |
Subject | Monoclonal antibodies | en_US |
Subject | Genetic immunization | en_US |
Subject | IgM and IgG isotypes | en_US |
Embargo date | 3000-01-10 | |