Polysaccharide diversity in VNI isolates of Cryptococcus neoformans from Roraima, Northern Brazil

Abstract

Espécies do gênero Cryptococcus compreendem patógenos fúngicos encapsulados ambientais que causam meningite letal em indivíduos imunossuprimidos. Em humanos, a captação fúngica de Cryptococcus hipocapsular por macrófagos foi associada à alta carga fúngica no fluido cerebrospinal e à sobrevivência de pacientes em longo prazo. Com base no papel fundamental da cápsula criptocócica na doença, analisamos a diversidade de estruturas capsulares em 23 isolados de excrementos de pombos coletados nas cidades de Boa Vista, Bonfim e Pacaraima, no estado de Roraima (norte do Brasil). Todos os isolados foram identificados como Cryptococcus neoformans (genótipo VNI) por espectrometria de massa MALDI-TOF. Por meio de uma combinação de microscopia de fluorescência, citometria de fluxo, ELISA e métodos espectrofotométricos, cada isolado foi caracterizado no nível fenotípico, o que incluiu medições de taxas de crescimento a 30 e 37 °C, pigmentação, tamanho do corpo celular, dimensões capsulares, reatividade sorológica, produção de urease e capacidade de produzir glucuronoxilomanano extracelular (GXM), o principal componente capsular de C. neoformans. Com exceção da melanização, uma diversidade formidável foi observada considerando todos os parâmetros testados em nosso estudo. De nota, hiper e hipoprodutores de GXM foram identificados, além de isolados com perfis hiper e hipo de reatividade com um anticorpo monoclonal de ligação a polissacarídeo. As dimensões capsulares também foram altamente variáveis ​​na coleta de isolados. A produção extracelular de GXM correlacionou-se positivamente com as dimensões capsulares, atividade da urease e tamanho da célula. Inesperadamente, as concentrações de GXM não se correlacionaram com a reatividade sorológica com a cápsula criptocócica. Esses resultados revelam uma alta diversidade na capacidade do C. neoformans ambiental de produzir componentes capsulares, o que pode afetar o resultado da criptococose humana.