Caracterização da cinética do perfil fenotípico e de redes integrativas de células T e B de pacientes com COVID-19 grave associada ao desfecho clínico da infecção.

Abstract

A covid-19 está associada diretamente a comorbidades pré-existentes e ao estado imunológico do paciente, o que pode levar a desfechos clínicos distintos. Este estudo teve como objetivo avaliar a cinética do perfil fenotípico e redes integrativas de células T e B em pacientes graves com COVID-19, categorizados de acordo com o desfecho clínico da doença para Alta ou Óbito. Para isso, foram coletadas amostras de sangue periférico de pacientes infectados por SARS-CoV-2 e internados no Hospital Risoleta Tolentino Neves em Belo Horizonte, MG, em momentos distintos: D0 (admissão do estudo), D7 e D14- 28 dias após a admissão no estudo. Foi realizada imunofenotipagem ex vivo por citometria de fluxo de células T e B para avaliação dos fenótipos de ativação, exaustão e memória celular, além de análises exploratórias para avaliação dos perfis celulares. Os resultados obtidos demonstraram uma diminuição geral na frequência de células T-CD3+ e T-CD4+ e um aumento de células B com perfil misto de ativação/exaustão em D0 quando comparado ao grupo controle. Também foram observados aumento das células B e TCD4+ em D7, e esses dados foram associados aos desfechos clínicos para Alta e Óbito, respectivamente. As redes integrativas entre as populações de células T e B mostrou uma menor conectividade de células em D0, comparado aos outros tempos. Perfis distintos em D7 e D14-28 revelaram que embora o grupo Alta estivesse associado ao aumento da conectividade entre as células B, T-CD4+ e T-CD8+, o grupo Óbito foi relacionado ao aumento de conectividades envolvendo células B, e uma diminuição dessas conexões em células T-CD4+. Os fenótipos de células T-CD4+CD38+ e T-CD8+CD69+ apresentaram uma excelente acurácia na classificação de COVID-19 vs. HC (Health Control) ao longo da cinética da linha do tempo. O perfil das subpopulações de células CD3+TIM-3+, TCD4+ TIM-3+ e CD4+CD45RO+CD27+ em D7, foi capaz de classificar os pacientes com COVID-19 de acordo com o desfecho clínico. Por fim, a análise de regressão logística binária (Odds Ratio) identificou os fenótipos T-CD4+T-bet+, T-CD8+T-bet+ e TCD4+ CD107a+, no tempo D0, e o fenótipo de memória T-CD4+CD45RO+CD27+, em D7, como fenótipos associados a diferentes desfechos clínicos na COVID-19. Dessa forma, os resultados mostraram que, em geral, as variações rítmicas fenotípicas distintas, juntamente com as redes integrativas de células T e B, estão associadas aos desfechos clínicos da doença e podem auxiliar futuramente no estabelecimento e monitoramento de biomarcadores aplicáveis no uso clínico e terapêutico da infecção viral.