Estudo do mecanismo de ação antiinflamatório do análogo de lidocaína JMF2-1 e sua potencial aplicabilidade no controle da asma

Abstract

A asma é caracterizada pela inflamação crônica nas vias aéreas causada por fatores ambientais em indivíduos geneticamente pré-dispostos. Estudos anteriores demonstraram que a nebulização com o análogo da lidocaína JMF2-1 poderia ser uma forma de atingir os efeitos antiasmáticos da lidocaína, sem apresentar a ação anestésica local. No entanto, permanecia pouco conhecido o mecanismo de ação pelo qual este composto atua, bem como seus alvos celulares prioritários. Neste trabalho estudamos os efeitos imunoregulatórios e o mecanismo de ação do JMF2-1. Modelos de inflamação pulmonar alérgica foram desenvolvidos, nos quais camundongos sensibilizados e desafiados antigenicamente foram tratados com JMF2-1 nebulizado. Usamos como comparação o tratamento com dexametasona sistêmica. Avaliamos o efeito do tratamento com JMF2-1 na mecânica pulmonar, no infiltrado leucocitário pulmonar e na apoptose das células infiltrantes no pulmão. Os ensaios in vitro foram realizados com células obtidas dos linfonodos de camundongos estimuladas antigenicamente e tratadas com JMF2-1 ou dexametasona. Avaliamos a apoptose destas células através da citometria de fluxo e inibidores de caspase foram utilizados como pré-tratamento para confirmar a via de apoptose. Concentrações intracelulares de AMPc foram quantificadas por radioimunoensaio em células T estimuladas e em células musculares lisas de traquéia de cobaia que foram tratadas com JMF2-1. O efeito anti-espasmódico de JMF2-1 foi analisado em anéis isolados de traquéia de rato. A imunossupressão foi avaliada através da análise dos órgãos linfóides dos camundongos após os tratamentos. A inalação de JMF2-1 inibiu a celularidade nos pulmões e a hiperreatividade brônquica dos animais desafiados antigenicamente, aumentando o percentual de células em apoptose nos pulmões, sem, no entanto, afetar a viabilidade e atividade de linfócitos na periferia. O tratamento in vitro com JMF2-1 aumentou a apoptose de linfócitos T estimulados de forma dependente da ativação de caspase 8 e em paralelo reduziu a expressão de GATA-3 e a produção de citocinas. Além disso, JMF2-1 aumentou os níveis intracelulares de AMPc em linfócitos estimulados e em células musculares lisas das vias aéreas e induziu o relaxamento dos anéis de traquéia em órgão isolado. Ao contrário da dexametasona, JMF2-1 não alterou a estrutura e a composição dos órgãos linfóides dos camundongos tratados. Nossos resultados demonstraram que JMF2-1 age aumentando os níveis intracelulares de AMPc em linfócitos T e em células musculares lisas de traquéia culminando na modulação da função e sobrevida de linfócitos T e no relaxamento de células musculares lisas das vias aéreas, sem induzir imunossupressão. Este trabalho reforça a importância de JMF2-1 como um novo protótipo na descoberta de medicamentos antiasmáticos que traz vantagens quando comparado à lidocaína e aos glicocorticóides.