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LINEAR B-CELL EPITOPES IN BTHTX-1, BTHTX-II AND BTHA-1, PHOSPHOLIPASE A2’S FROM BOTHROPS JARARACUSSU SNAKE VENOM, RECOGNIZED BY THERAPEUTICALLY NEUTRALIZING COMMERCIAL HORSE ANTIVENOM
Peptide array
SPOT-synthesis
Synthetic peptides
B-epitopes
Antigenic determinants
Author
Affilliation
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Desenvolvimento Tecnológico em Saúde. Instituto Nacional de Ciência e Tecnologia de Inovação em Doenças Negligenciadas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Bioquímica de Proteínas e Peptídeos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Universidade Federal Fluminense. Instituto de Biologia. Departamento de Biologia Celular e Molecular. Niterói, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratorio de Bioquímica de Proteínas e Peptídeos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Universidade Federal Fluminense. Instituto de Biologia. Departamento de Biologia Celular e Molecular. Niterói, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratorio de Bioquímica de Proteínas e Peptídeos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Universidade Federal Fluminense. Instituto de Biologia. Departamento de Biologia Celular e Molecular. Niterói, RJ, Brasil.
Universidade Federal da Paraíba. Centro de Ciências Exatas e da Natureza. Departamento de Biologia Molecular. João Pessoa, PB, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Bioquímica de Proteínas e Peptídeos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Instituto Vital Brazil. Laboratório de Pesquisa e Desenvolvimento. Niterói, RJ, Brasil.
Instituto Vital Brazil. Laboratório de Pesquisa e Desenvolvimento. Niterói, RJ, Brasil.
Universidade Federal da Paraíba. Centro de Ciências Exatas e da Natureza. Departamento de Biologia Molecular. João Pessoa, PB, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratorio de Bioquímica de Proteínas e Peptídeos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Universidade Federal Fluminense. Instituto de Biologia. Departamento de Biologia Celular e Molecular. Niterói, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratorio de Bioquímica de Proteínas e Peptídeos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Universidade Federal Fluminense. Instituto de Biologia. Departamento de Biologia Celular e Molecular. Niterói, RJ, Brasil.
Universidade Federal da Paraíba. Centro de Ciências Exatas e da Natureza. Departamento de Biologia Molecular. João Pessoa, PB, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Bioquímica de Proteínas e Peptídeos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Instituto Vital Brazil. Laboratório de Pesquisa e Desenvolvimento. Niterói, RJ, Brasil.
Instituto Vital Brazil. Laboratório de Pesquisa e Desenvolvimento. Niterói, RJ, Brasil.
Universidade Federal da Paraíba. Centro de Ciências Exatas e da Natureza. Departamento de Biologia Molecular. João Pessoa, PB, Brasil.
Abstract
The benefits from treatment with antivenom sera are indubitable. However, the mechanism
for toxin neutralization has not been completely elucidated. A mixture of antibothropic and anti-crotalic horse antivenom has been reported to be more effective in neutralizing the effects of Bothrops jararacussu snake venom than anti-bothropic antivenom alone. This study determined which regions in the three PLA2s from B. jararacussu snake venom are bound by antibodies in tetravalent anti-bothropic and monovalent anticrotalic commercial horse antivenom. Mapping experiments of BthTX-I, BthTX-II and BthAI using two small libraries of 69 peptides each revealed six major IgG-binding epitopes that were recognized by both anti-bothropic and anti-crotalic horse antivenom. Two epitopes in BthTX-I were only recognized by the anti-bothropic horse antivenom, while anti-crotalic horse antivenom recognized four unique epitopes across the three PLA2s. Our studies suggest that the harmful activities of the PLA2s present in the venom of B. jararacussu are neutralized by the combinatorial treatment with both antivenom sera through their complementary binding sites, which provides a wide coverage on the PLA2s. This is the first peptide microarray of PLA2s from B. jararacussu snake venom to survey the performance of commercial horse antiophidic antivenom. Regions recognized by the protective antivenom sera are prime candidates for improved venom cocktails or a chimeric protein encoding the multiple epitopes to immunize animals as well as for designing future synthetic vaccines.
Keywords
Phospholipase A2Peptide array
SPOT-synthesis
Synthetic peptides
B-epitopes
Antigenic determinants
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