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Title: FC-TRIPLEX Chagas/Leish IgG1: A Multiplexed Flow Cytometry Method for Differential Serological Diagnosis of Chagas Disease and Leishmaniasis
Authors: Carvalho, Andrea Teixeira de
Campos, Fernanda Magalhães Freire
Geiger, Stefan Michael
Rocha, Roberta Dias Rodrigues
Araújo, Fernanda Fortes de
Avelar, Danielle Marquete Vitelli
Andrade, Mariléia Chaves
Araújo, Márcio Sobreira Silva
Lemos, Elenice Moreira
Proietti, Anna Bárbara de Freitas Carneiro
Sabino, Ester Cerdeira
Caldas, Rafaella Gaiotti
Freitas, Carolina Renata Camargos
Azevedo, Ana Carolina Campi
Santos, Silvana Maria Elói
Martins Filho, Olindo Assis
Affilliation: Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Laboratório de Biomarcadores de Diagnóstico e Monitoração. Belo Horizonte, MG, Brasil
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Laboratório de Biomarcadores de Diagnóstico e Monitoração. Belo Horizonte, MG, Brasil
Universidade Federal de Minas Gerais. Instituto de Ciências Biológicas. Departamento de Parasitologia. Laboratório de Helmintoses Intestinais. Belo Horizonte, MG, Brasil
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Laboratório de Biomarcadores de Diagnóstico e Monitoração. Belo Horizonte, MG, Brasil
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Laboratório de Biomarcadores de Diagnóstico e Monitoração. Belo Horizonte, MG, Brasil
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Laboratório de Biomarcadores de Diagnóstico e Monitoração. Belo Horizonte, MG, Brasil
Universidade Estadual de Montes Claros. Centro de Ciências Biológicas e da Saúde. Departamento de Fisiopatologia. Montes Claros, MG, Brasil
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Laboratório de Biomarcadores de Diagnóstico e Monitoração. Belo Horizonte, MG, Brasil
Universidade Federal do Espírito Santo. Centro Biomédico. Núcleo de Doenças Infecciosas. Vitória, ES, Brasil
Fundação Centro de Hematologia e Hemoterapia de Minas Gerais. Serviço de Pesquisa. Belo Horizonte, MG, Brasil
Universidade de São Paulo. Instituto de Medicina Tropical. Departamento de Doenças Infecciosas. São Paulo, SP, Brasil
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Laboratório de Biomarcadores de Diagnóstico e Monitoração. Belo Horizonte, MG, Brasil
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Laboratório de Biomarcadores de Diagnóstico e Monitoração. Belo Horizonte, MG, Brasil
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Laboratório de Biomarcadores de Diagnóstico e Monitoração. Belo Horizonte, MG, Brasil
Universidade Federal de Minas Gerais. Faculdade de Medicina. Departamento de Pós-Graduação em Patologia Geral. Belo Horizonte, MG, Brasil/Universidade Federal de Minas Gerais. Faculdade de Medicina. Departamento de Propedêutica Complementar. Belo Horizonte, MG, Brasil
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Laboratório de Biomarcadores de Diagnóstico e Monitoração. Belo Horizonte, MG, Brasil
Abstract: Differential serological diagnosis of Chagas disease and leishmaniasis is difficult owing to cross-reactivity resulting from the fact that the parasites that cause these pathologies share antigenic epitopes. Even with optimized serological assays that use parasite-specific recombinant antigens, inconclusive test results continue to be a problem. Therefore, new serological tests with high sensitivity and specificity are needed. In the present work, we developed and evaluated the performance of a new flow cytometric serological method, referred to as FC-TRIPLEX Chagas/Leish IgG1, for the all-in-one classification of inconclusive tests. The method uses antigens for the detection of visceral leishmaniasis, localized cutaneous leishmaniasis, and Chagas disease and is based on an inverted detuned algorithm for analysis of anti-Trypanosomatidae IgG1 reactivity. First, parasites were label with fluorescein isothiocyanate or Alexa Fluor 647 at various concentrations. Then serum samples were serially diluted, the dilutions were incubated with suspensions of mixed labeled parasites, and flow cytometric measurements were performed to determine percentages of positive fluorescent parasites. Using the new method, we obtained correct results for 76 of 80 analyzed serum samples (95% overall performance), underscoring the outstanding performance of the method. Moreover, we found that the fluorescently labeled parasite suspensions were stable during storage at room temperature, 4°C, and –20°C for 1 year. In addition, two different lots of parasite suspensions showed equivalent antigen recognition; that is, the two lots showed equivalent categorical segregation of anti-Trypanosomatidae IgG1 reactivity at selected serum dilutions. In conclusion, we have developed a sensitive and selective method for differential diagnosis of Chagas disease, visceral leishmaniasis, and localized cutaneous leishmaniasis.
Keywords: Leishmaniasis
Chagas disease
Trypanosoma cruzi
Serology
Leishmania infantum
Parasitic diseases
Flow cytometry
Serodiagnosis
Issue Date: 2015
Publisher: Public Library of Science
Citation: CARVALHO, Andréa Teixeira et al. FC-TRIPLEX Chagas/Leish IgG1: A Multiplexed Flow Cytometry Method for Differential Serological Diagnosis of Chagas Disease and Leishmaniasis. PLoS One, vol. 10, n. 4, p. e0122938, 2015
DOI: 10.1371/journal.pone.0122938
ISSN: 1932-6203
Copyright: open access
Appears in Collections:IRR - Artigos de Periódicos

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